Cu2S量子点的表面功能化及其生物载药释放研究

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乳腺癌是女性常见的三大恶性致死肿瘤之一,其具有难发现、难诊断、难治愈,且就诊时常为癌症晚期等亟待攻克问题。随着新的化疗药品的推出以及化疗方案的不断改进,乳腺癌治疗的效果已大大改善,但肿瘤细胞对药物的耐药性却是愈后患者产生不良反应的重要原因之一。而纳米材料载药释放技术的产生,使乳腺癌的治疗效率得到了进一步的提高。这是由于纳米颗粒的尺寸较小,当将其与药物进行偶联时,可以较为容易的进入细胞内部,再通过外界因素激发实现药物释放。在以往对纳米材料载药释放的研究中,人们所选取的纳米材料大多为II-VI含镉(Cd)量子点。此类材料存在一定的弊端——重金属元素Cd会对生物体造成比较严重的损伤。与之相比,Cu2S量子点作为一种新型的半导体纳米材料,因其优异的非线性光学特性、较高的稳定性和生物低毒性已被人们广泛关注。而稳定性和毒性正是评价物质是否适用于生物领域的重要因素。因此,本文选取Cu2S量子点作为药物载体。首先对叶酸(FA)修饰后的纳米材料进行癌细胞标记,证明该量子点进入细胞方案的可行性;其次利用阿霉素盐酸盐(DOX)与Cu2S量子点结合,进入细胞内部,在飞秒激光作用下,促使量子点表面存在的光敏化学键发生收缩,实现药物释放;最后再对药物浓度、光学稳定性及光照时间等参数进行数据采集分析,得出最佳药物释放效率所对应的药物浓度和光照时间,为其在药物释放方面的应用研究提供坚实可靠的实验依据。本文的主要研究内容如下:1.油性Cu2S量子点的制备及其表面修饰利用高温油相合成法制备油性Cu2S量子点,通过反应温度调节获得不同尺寸的Cu2S量子点,并对其进行相关物理表征。为保证其与生物的兼容性,需改变Cu2S表面疏水基团——油性Cu2S量子点转换为水性Cu2S量子点,再对转水后的Cu2S量子点进行表面修饰,证明其进入细胞的方案可行。2.水相Cu2S量子点的制备、相关生物毒性及稳定性研究利用不同稳定剂对Cu2S量子点进行水相合成法制备。首先,对不同稳定剂下所制备出的Cu2S量子点进行紫外-可见吸收光谱、EDS能谱、透射电子显微、傅里叶变换红外光谱以及X射线衍射等物理表征分析。其次,通过拉曼光谱模拟,对不同稳定剂下合成的Cu2S量子点的拉曼光谱所带来的影响进行理论分析。随后,对其进行相关胶体稳定性测试,对比不同稳定剂下Cu2S量子点的稳定性,得出最优结果。最后,通过体外生物毒性测试,得出最适合进行药物释放研究的Cu2S量子点所对应的稳定剂,并对该稳定剂下的Cu2S量子点进行表面叶酸修饰及生物成像实验,证明生物标记的可行性。3.Cu2S量子点生物药物释放研究对水性Cu2S量子点进行表面修饰及药物偶联,通过飞秒激光作用进行药物释放研究。首先,对水相Cu2S量子点进行失活牛血清蛋白(d BSA)修饰以提高其生物稳定性及兼容性。其次,对其进行药物分子偶联,并对修饰后的Cu2S量子点进行物理表征分析。最后,利用飞秒激光对偶联后的Cu2S量子点进行照射及体外药物释放研究(药物释放部分:药物浓度、光照时间、光强、入射光波长以及药物光学稳定性等测试)。通过对这几种检测方式的结果进行统计分析,最终获得最佳药物释放效率对应的相关参数。
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