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目的：研究南瓜蛋白(cucurmosin，CUS)对人胰腺癌(Pancreatic Cancer，PC)细胞株的增殖抑制作用和对细胞重要分子EGFR的影响，以及CUS联合吉非替尼（Gefitinib，GEF）对胰腺癌细胞株的作用；探讨CUS对人胰腺癌细胞的影响及其机制，为CUS可能的抗胰腺癌临床应用提供理论基础和实验依据。方法：1.采用SRB法测定CUS单用及其与GEF联用对体外培养的人胰腺癌PANC‐1和BxPC‐3细胞的增殖抑制作用。2.集落形成实验测定CUS单用及其与GEF联用对体外培养的人胰腺癌PANC‐1和BxPC‐3细胞集落形成的影响。3. Western‐blot技术检测CUS单用以及与GEF联用对体外培养的人胰腺癌PANC‐1和BxPC‐3细胞EGFR的影响,CUS对细胞EGFR下游通路蛋白表达的影响。4. RT‐PCR技术检测CUS作用于体外培养的人胰腺癌PANC‐1和BxPC‐3细胞对EGFR mRNA的影响。结果：1. SRB法结果显示，CUS对体外培养的人胰腺癌PANC‐1和BxPC‐3细胞具有显著的增殖抑制作用，并呈明显的剂量依赖性和时间依赖性。CUS对PANC‐1细胞作用24h、48h和72h的IC50分别为(12.50±0.012)μmol/L、(0.2678±0.020)μmol/L和(0.0677±0.018)μmol/L；CUS对BxPC‐3细胞作用24h、48h和72h的IC50分别为(7.88±0.035)μmol/L、(0.7638±0.026)μmol/L和(0.2935±0.023)μmol/L。2.集落形成实验表明随着随着浓度的增加CUS对人胰腺癌PANC‐1和BxPC‐3细胞集落形成抑制率逐渐增加，呈明显剂量依赖性。当CUS浓度为0.025μmol/L时对PANC‐1细胞集落形成抑制率为92.37%；当CUS浓度为0.05μmol/L时对BxPC‐3细胞集落形成抑制率为82.39%。3.不同浓度CUS分别作用于人胰腺癌PANC‐1和BxPC‐3细胞72h后对上述细胞EGFR蛋白表达的水平均有下调作用，呈剂量依赖性，而对EGFR mRNA的表达水平均无明显影响；CUS亦可下调EGFR下游Ras/Raf通路及PI3K/Akt通路蛋白的表达水平。4. CUS联合GEF作用人胰腺癌PANC‐1和BxPC‐3细胞与各自药物单用相比具有以下结果：①联合用药组对细胞的增殖抑制率大于各自药物单用组，q>0.85；②联合用药组可明显下调细胞EGFR蛋白表达，q>1.15。③联合用药组的集落形成抑制率大于各自药物单用组，q＞1.15；结论：1. CUS对体外培养的人胰腺癌PANC‐1和BxPC‐3细胞具有明显的增殖抑制作用，呈时间依赖性和剂量依赖性。2. CUS可明显下调体外培养的人胰腺癌PANC‐1和BxPC‐3细胞EGFR蛋白的表达水平，但对EGFR mRNA水平上却未见明显影响，提示CUS仅通过干扰蛋白翻译的阶段而发挥作用；并且CUS也可抑制细胞EGFR下游Ras/Raf通路及PI3K/Akt通路蛋白的表达。3. CUS与GEF联用对体外培养的人胰腺癌PANC‐1和BxPC‐3细胞的增殖抑制呈协同作用。