论文部分内容阅读
本研究以武夷名丛中的早生种金凤凰、中生种金锁匙以及晚生种肉桂的成年茎段为材料,对武夷名丛的离体培养进行了研究,建立了武夷名丛的无菌系,并对其无菌芽苗进行增殖、生根研究,比较3个品种间的差异,同时还探讨了提取测定茶叶内源激素的一些基本条件参数,并对外植体以及离体培养过程中的培养物进行内源激素的HPLC分析,最后对离体培养前后的材料进行RAPD分析检测其遗传变异性。主要研究结果如下:1、武夷名丛成年材料离体培养研究。试验比较了不同消毒方法、不同切割方式以及光照强度、不同的生长素种类、GA3浓度、不同的激素水平以及盐和糖的浓度等因素对武夷名丛腋芽诱导的影响,此外,还比较了不同激素水平对增殖的影响以及不同盐浓度和生长素种类对生根的影响。结果表明:以取春季以及一芽二叶时期二叶位的茎段材料为接种外植体最为合适;用0.1%升汞消毒剂浸泡9-11min为最佳消毒方法,但应视不同品种以及老嫩度而定,将肉桂接种于MS+2.0 mg·L-1BA+0.5 mg·L-1IAA+0.5 mg·L-1 GA3中适合其启动培养;用培养基1/2MS+1.0-1.5 mg·L-1BA+0.2-0.8 mg·L-1IAA+0.2 mg·L-1 GA3继代培养武夷名丛可以达到一定的增殖效果,金凤凰在培养基中的适应能力比金锁匙和肉桂好;培养基1/4MS+4mg·L-1NAA中含低矿质盐浓度和较高的生长素,有利于生根。本试验通过增殖培养,平均增殖系数为3,可以预计在这个培养体系情况下,一年内从一个腋芽可以增殖培养729个腋芽,这在茶叶生产中具有广阔的应用前景。2、武夷名丛茶树内源激素变化的HPLC研究。(1)茶叶内源激素的检测,结果表明:GA3、IAA选择波长分别为207 nm和280 nm,ABA、ZT选择波长分别为280 nm和254nm;用于GA3分析的流动相为甲醇-乙腈-KH2PO3缓冲液系统(15:15:70,v/v,pH 3.5);用于检测IAA和ABA的流动相为甲醇-乙腈-KH2PO3缓冲液系统(20:20:60,v/v,pH 3.5);用于检测Zeatin的流动相为甲醇-乙腈-磷酸缓冲液系统(15:15:70,v/v,pH 7.0);(2)武夷名丛茶树外植体与试管苗的内源激素的测定,结果表明:品种(系)间的内源激素含量及含量变化幅度差异可能与其遗传特性有关,GA3是茶树生长发育不可缺少的内源激素之一;肉桂品种不同生长时期二叶位叶片以及同一生长时期不同部位的叶片含量,以二叶位的新梢生长旺盛,内源激素变化幅度比较大,春季是促进芽苗生长的最合适的季节。添加了外源激素BA、IAA、GA3情况下茶叶芽苗增殖的效果比无添加任何激素的茶叶芽苗效果好,内源IAA和ZT的含量上升了,但是GA3的含量反而逐渐下降,在整个离体培养过程中ABA的含量变化不大。3、武夷名丛试管苗遗传稳定性的RAPD检测。结果表明:肉桂品种离体培养前后存在变异,但变异率仅为4.13%,从生产角度考虑,在田间存在4.13%的变异植株并不影响茶叶产品的品质。因此离体培养材料选用茎切段分生组织比较合理。同时发现,组培苗的纯度更高,且外植体和试管苗的DNA浓度相当,含量稳定,也可作为方便取材,提取茶叶DNA的理想材料。