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文心兰为兰科(Orchidaceae)文心兰属（Oncidium）植物的总称，又名舞女兰、跳舞兰，原产于中南美洲和北美洲南部。其花序分枝性良好，花色亮丽，花形优美，具有良好的观赏价值。近年来随着分子生物学在花卉相关研究以及在育种过程中的应用，观赏植物开花相关基因及其功能的研究成为当今研究的热点，但是对文心兰开花相关基因的研究还很少。本研究以文心兰的花葶为材料，采用RT-PCR和RACE技术等方法，克隆出了文心兰的开花相关基因OnAP1(APETALA1)-like的保守序列及其全长序列开放阅读框(ORF)的扩增，并对其进行了生物信息学分析;利用qRT-PCR技术分析该基因在不同时期不同器官的表达特性，并对文心兰OnAP1-like基因进行了植物表达载体的构建;以及对文心兰的遗传转化。主要研究结果如下: 1、文心兰OnAP1-like基因cDNA全长序列的克隆及序列分析 以南茜文心兰（OncidiumGowerRamsey）盛花期花葶提取的总RNA为模板，通过RT-PCR与RACE扩增，获得一个958bp的AP1(APETALA1)-like基因的cDNA全长序列，其基因编码区690bp，共编码氨基酸229个，命名为OnAP1-like（登录号:KC426946）。蛋白质二级结构分析表明，该蛋白质48.91％为α螺旋，10.92％为β折叠，40.17％为无规则卷曲，为亲水性蛋白质。蛋白序列比对和进化树分析表明，OnAP1-like蛋白与蕙兰AP1-like蛋白一致性最高，进化距离最近。预测了该蛋白质的三维结构。 2、文心兰OnAP1-like基因植物表达载体pR1101-OnAP1的构建 将克隆的OnAP1-like基因连接在pMD19-T上构建克隆载体pMD19-OnAP1。测序结果正确的pMD19-OnAP1和质粒pRI101ON经限制性内切酶XbaⅠ/SmaⅠ双酶切后，经T4DNA连接酶连接后，构建成植物表达载体pRI101-OnAP1。经过菌落筛选、PCR检测以及双酶切验证，最终确定文心兰OnAP1-like基因的植物表达载体pRI101-OnAP1构建成功，为遗传转化及杂交验证打下基础。 3、采用qRT-PCR技术对文心兰OnAP1-like基因进行时空表达分析 利用RT-qPCR对从文心兰不同时期不同器官中的OnAP1-like基因表达量进行分析，用2-ΔΔCt法来计算，结果表明，同一器官不同发育时期比较，在叶中，花蕾期的表达量最高;在根中，随发育时间推移，表达量逐渐升高，至花后期达到最高;在花葶中的表达量的趋势与根相同。同一时期不同器官比较，抽葶前，根中表达量高于叶片;花蕾期，花瓣中的表达量最高;盛花期和花后期，花葶中的表达量最高。推测该基因在花的发育及形成中发挥作用。 4、对文心兰愈伤组织进行了遗传转化 以前人的实验结果为依据，探索了用农杆菌介导法转化文心兰所需要的条件，并最终确定了一个文心兰的遗传转化体系。