【摘 要】
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植物逆境又称植物胁迫,是对植物生长、生存等一切不利因素的总称,自然界中植物生长发育过程和生理活动受逆境密切影响。在植物抗逆过程中,激素调节发挥重要作用,其中水杨酸（Salicylic acid,SA）参与植物生长发育的多个过程,并与植物抗逆息息相关。SA信号从产生到激发相应的生理效应需经过一系列紧密联系的信号传递过程,SA被受体识别后,最终由下游的转录因子调控相关基因表达,期间信号的传递涉及到许多
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植物逆境又称植物胁迫,是对植物生长、生存等一切不利因素的总称,自然界中植物生长发育过程和生理活动受逆境密切影响。在植物抗逆过程中,激素调节发挥重要作用,其中水杨酸（Salicylic acid,SA）参与植物生长发育的多个过程,并与植物抗逆息息相关。SA信号从产生到激发相应的生理效应需经过一系列紧密联系的信号传递过程,SA被受体识别后,最终由下游的转录因子调控相关基因表达,期间信号的传递涉及到许多调控蛋白。相关文献报道,Nonexpresser of pathogenesis-related proteins 1（NPR1）是SA信号通路的关键调控因子,通过与下游转录因子互作促进相关基因的表达。Nonexpresser of pathogenesis-related proteins 3/4（NPR3/4）同属于NPR家族,是NPR1的两个类似物,与NPR1具有高度的序列相似性和相似的结构域,作为SA的受体负调控免疫反应。目前,关于NPR1是否直接结合SA还存在争议。SA信号通路对研究植物生长发育过程及植物抗逆境胁迫过程至关重要,然而目前相关机制仍不明朗,因而NPR家族作为SA受体具有重要的研究意义。本文以拟南芥NPR1和NPR4为研究对象,对二者进行蛋白晶体学研究,旨在加深对植物SA调控系统的理解。实验设计在大肠杆菌BL21（DE3）中进行蛋白表达纯化,对NPR1截短体进行了蛋白晶体优化,包括与重金属汞的共晶优化,得到最高分辨率为2.83?的晶体;同时根据同源序列比对、二级结构预测结合限制酶切实验结果,设计了一系列NPR4截短体,与NPR4全长、单突变体一同开展表达纯化方案的优化,最终得到了状态良好的NPR4蛋白,并对蛋白晶体进行了筛选优化。本文对NPR1、NPR4蛋白表达纯化、晶体结构解析以及功能探索提供了参考。
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