噬菌体展示随机五肽库的构建

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丝状噬菌体随机肽库是噬菌体展示技术的重要组成部分,它通过将随机DNA片段与丝状噬菌体衣壳蛋白融合表达于噬菌体表面,而构成了一个可筛选、扩增的肽库.与其它筛选体系相比,噬菌体随机肽库提供更多的备选个体,具有较大的应用潜力.该文试图通过构建丝状噬菌体随机5肽库,建立一种构建肽库的方法,为更好地利用肽库技术进行蛋白质相互作用的研究打下基础.在随机5肽库的构建工作中,利用ABI公司生产的394型DNA合成仪合成了插入片段及引物的单链DNA序列,并延伸为双链.做了一些载体的提取方法的研究.对载体和插入片段进行了酶切,认为插入片段双链可直接进行双酶切,而载体则需要分别进行单酶切.连接后进行了电转化,在随后的库容检验中,发现效果不理想,具体原因可能是在DNA的纯化、回收、酶切等环节有问题.
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