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目的：1、分析ERC(N~5)与人脐静脉内皮细胞HUVEC结合的情况2、观察ERC(N~5)对HUVEC细胞凋亡及侵袭作用的影响方法：1、ERC(N~5)小肽的设计与合成将蛇毒锯鳞蝰素（Echistatin，Ech）氨基酸序列中的RGD模体及其周边序列直接与C末端序列结合，突变第五个氨基酸（D→N）并适当减少氨基酸的数目，设计成含16个氨基酸的小肽，其序列为ARGDNMPRNPHKGPAT，命名为ERC(N~5)，由西安联美生物科技有限公司合成。2、ERC(N~5)与人脐静脉内皮细胞HUVEC的结合情况分析利用流式细胞术（flowcytometry，FCM）检测人脐静脉内皮细胞表面αvβ3的表达情况；分别将ERC(N~5)、Ech、FITC-LM609（整合素αvβ3的单克隆抗体）与HUVEC细胞共同孵育后，流式细胞术检测FITC标记的阳性细胞率，分析ERC(N~5)/Ech与抗体竞争结合αvβ3的情况。3、ERC(N~5)对HUVEC细胞凋亡、侵袭作用的研究倒置显微镜观察ERC(N~5)处理后的HUVEC形态变化；通过AO/EB对细胞核染色观察细胞形态的变化；AnnexinV-FITC/PI双染法结合流式细胞仪检测ERC(N~5)对HUVEC凋亡率的影响；用RT-PCR检测细胞凋亡基因Caspase-3表达。利用细胞划痕愈合实验、Transwell迁移实验和Matrigel侵袭实验观察ERC(N~5)对HUVEC迁移、侵袭能力的影响。结果：1、人脐静脉内皮细胞HUVEC细胞表面整合素αvβ3表达量为68.3%。2、ERC(N~5)、FITC-LM609与HUVEC细胞共孵育后，FITC标记的阳性细胞率随着ERC(N~5)浓度的增大而逐渐减小。终浓度为16μM的ERC(N~5)与Ech分别与HUVEC孵育后，其αvβ3阳性细胞率分别为1.2%和26.8%。3、HUVEC经ERC(N~5)作用24h后，细胞变圆、间隙增大、有细胞碎片出现。经AO/EB染色后，出现核染色质着绿色呈固缩状的早期凋亡细胞和核染色质为橘红色的晚期凋亡细胞。细胞凋亡率检测结果显示，ERC(N~5)作用HUVEC细胞后，凋亡率增加5倍。4、RT-PCR结果显示在经ERC(N~5)处理后Caspase-3基因表达较对照组明显增加，且有剂量依赖关系。5、ERC(N~5)作用下，HUVEC细胞的迁移和侵袭能力分别降低至78.5%和87%；细胞划痕愈合实验表明，细胞培养24小时后，阴性对照组细胞划痕已经基本愈合，ERC(N~5)处理组划痕依然清晰。结论：1、人脐静脉内皮细胞HUVEC细胞表面高表达整合素αvβ3，ERC(N~5)能够通过与αvβ3识别从而与HUVEC结合。2、ERC(N~5)能够促进HUVEC凋亡，从而抑制HUVEC的增殖，也能抑制HUVEC的侵袭和迁移能力。