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本文以军曹鱼(Rachycentron canadium)为研究对象，采用同源克隆、RACE-PCR技术，对军曹鱼Hepcidin基因进行了克隆，获得了军曹鱼Hepcidin基因的全长cDNA序列。利用荧光定量PCR(QRT-PCR)技术对Hepcidin在mRNA水平上的表达量进行了分析，分析了该基因在军曹鱼正常组织中的分布以及在分别注射脂多糖（LPS）和鲨鱼弧菌（Vibrio carchariae）前后在肝脏、头肾、脾脏中的表达变化。成功构建了Hepcidin基因的原核表达载体。军曹鱼Hepcidin基因全长cDNA序列含714 bp，包括213 bp的5’末端非编码区（5’UTR），228 bp的3’末端非编码区（3’UTR）及273 bp的开放阅读框（ORF），编码90个氨基酸。军曹鱼Hepcidin基因开放阅读框分为信号肽、前肽和成熟肽区，每个区域分别由24个氨基酸、40个氨基酸和26个氨基酸组成，信号肽的分割位点在24位的丙氨酸（Ala）和25位的缬氨酸（Val）之间，成熟肽区域存在8个保守的半胱氨酸位点。预测其蛋白质分子量约为10.03 KDa，等电点为7.54。对其氨基酸序列进行同源性分析，结果表明，军曹鱼和已知鱼类及哺乳动物Hepcidin氨基酸的同源性在85.6 %~24.4 %之间。通过氨基酸比对，构建了Hepcidin氨基酸序列的系统进化树，发现军曹鱼和黄鳝的关系最近。利用QRT-PCR技术分析发现Hepcidin基因在已检测的军曹鱼各个正常组织中均表达，其中于肝脏、头肾、脾脏的表达较强；肠、鳃、心脏、皮肤表达程度中等；在血液、脑、胃中表达较弱。军曹鱼稚鱼经LPS以及鲨鱼弧菌分别刺激后，Hepcidin基因表达在肝脏、头肾、脾脏中上升，在肝脏中Hepcidin的表达量上升最快，在6 h已达到表达最高峰，头肾、脾脏中Hepcidin的表达量均在24 h达到表达最高峰，且肝脏中的表达量与头肾和脾脏相比较是最多的。经鲨鱼弧菌刺激后，肝脏在12 h时Hepcidin的表达量达到最高峰，头肾和脾脏均在24 h的时候达到最高峰且与头肾和脾脏相比肝脏中的表达量要多。说明在外源效应因子的刺激作用下，可诱导免疫器官迅速合成急性反应蛋白Hepcidin，作用于外源效应因子，从而对机体进行保护。成功构建了PTYB11-Hepcidin的重组质粒，并将其转入表达菌株E.coli ER2566，用IPTG进行诱导表达，之后进行SDS-PAGE，基因表达产物出现在66.03 KDa处，经Western Blot检验，证明表达出的重组蛋白与预期结果相符。经IPTG诱导表达之后，进行超声破碎，上清中没有目的蛋白，说明重组蛋白应以包涵体形式存在。该重组质粒的构建为进一步深入研究军曹鱼Hepcidin的结构与功能提供了很好的实验依据。