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研究背景单纯性自主神经功能衰竭(Pure autonomic failure,PAF)是以单纯自主神经功能障碍为临床特征的α-突触核蛋白病。帕金森病(Parkinson’s disease,PD)、路易体痴呆(Dementia with Lewy bodies,DLB)、多系统萎缩(Multiple system atrophy,MSA)和PAF的不同临床表现是由于α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)阳性包涵体选择性累及中枢或外周神经系统中不同核团、区域所致。自主神经功能障碍在α-突触核蛋白病较为常见,但目前尚无合适的动物模型用于探索α-突触核蛋白病中自主神经功能障碍的起源和发病机制。目的观察星状神经节内注射外源性α-Syn纤维体对TgM83+/-转基因小鼠自主神经功能及运动功能的影响,拟构建PAF的动物模型并探讨α-突触核蛋白病自主神经功能障碍的病理机制。方法1.α-Syn纤维体的制备及检测。2.将8周龄TgM83+/-小鼠随机分为2组,每组20只,实验组(α-SYN组)双侧星状神经节注射α-Syn纤维体,对照组(PBS组)注射磷酸盐缓冲液(Phosphate buffered saline,PBS)。3.分别于注射后8周、12周、16周、20周灌注后留取脑、脊髓、星状神经节、心肌、皮肤组织。4.利用免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)、免疫组织荧光(Immunofluorescence,IF)及免疫蛋白印迹法(Western blotting,WB)检测自主神经通路中病理性α-Syn阳性包涵体沉积。5.监测小鼠心率、血压,评价心血管功能,发汗试验评价泌汗功能,食物埋藏试验评价嗅觉功能;转棒、爬杆、足印、挂线测试评价运动功能。结果1.制备的α-Syn纤维体平均长度为67.56±41.86 nm2.注射4周后α-SYN组小鼠的星状神经节可检测到少量的病理性α-Syn阳性包涵体;3.注射8周后α-SYN组小鼠的自主神经通路中检测到病理性α-Syn阳性包涵体;4.注射12周后α-SYN组小鼠的病理性α-Syn包涵体明显增多;5.α-SYN组小鼠在注射后12周出现体位性低血压但心率没有变化,其中立位血压与PBS组小鼠相比明显下降(P<0.01);6.α-SYN组小鼠在注射后16周较PBS组小鼠泌汗功能明显减退(P<0.0001);7.α-SYN组小鼠在注射后16周较PBS组小鼠嗅觉明显减退(P<0.0001)。8.整个实验过程中两组小鼠均未出现运动功能障碍。结论1.星状神经节内注射外源性的α-Syn纤维体可诱导α-Syn阳性包涵体在自主神经节中形成并沿自主神经通路向中枢神经系统和外周自主神经效应器官双向播散。2.星状神经节内注射外源性的α-Syn纤维体可诱导小鼠出现体位性低血压、少汗、嗅觉减退等自主神经障碍症状,而无运动障碍。