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目的:微小RNA(MicroRNAs,miRNAs)是一类存在于真核生物中具有高度保守性序列的单链非编码RNA。MiRNA通过结合到靶基因的3’端非翻译区(untranslatedregion,UTR)在转录后水平进行靶基因表达的调控。大量的研究表明miRNA在各种生物学进程中都发挥着至关重要的作用,特别是在肿瘤的发生、增殖、凋亡、侵袭及转移过程中。研究表明miR-200c-3p在多种肿瘤中表达异常,然而其在前列腺癌中的调控机制尚不明确。本研究拟进一步探讨miR-200c-3p对前列腺癌去势抵抗细胞株PC3和DU145细胞功能的影响及对ZEB2(Zinc Finger E-Box Binding Homeobox 2)以及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)通路蛋白表达的调控。材料和方法:应用实时荧光定量PCR法检测16对前列腺癌组织和癌旁前列腺正常组织样本中miR-200c-3p的表达水平,采用蛋质印迹法(Western blot)检测11对前列腺癌组织和癌旁前列腺正常组织样本中ZEB2蛋白的表达水平。将内源性miR-200c-3p模拟物(miR-200c-3p mimics)分别转染PC3和DU145细胞株,应用实时荧光定量PCR法和蛋质印迹法(Western blot)分别检测转染组与对照组PC3和DU145细胞中的miR-200c-3p和ZEB2蛋白以及EMT通路相关蛋白E-cadherin和Vimentin的表达情况,并通过细胞侵袭实验和划痕实验检测转染后和PC3和DU145侵袭能力和细胞迁移的改变。并用双荧光素酶报告基因验证ZEB2基因的3’-UTR是否有miR-200c-3p的结合部位。结果:与16例自身配对的癌旁前列腺正常组织相比,16例前列腺癌组织中的miR-200c-3p的表达水平明显下调。Western blot结果表明自身配对的11对前列腺癌组织中的ZEB2蛋白的表达水平显著高于癌旁前列腺正常组织。两者间这种负相关结果表明miR-200c-3p与ZEB2很可能共同作用于前列腺癌发生、发展的过程中。在体外细胞实验中,miR-200c-3p mimics转染后72小时后,与转染阴性对照组(negative control,NC)比较,PC3和DU145细胞中ZEB2蛋白的表达量明显下降(P<0.05),伴随EMT通路相关蛋白E-cadherin的表达水平显著上调(P<0.05),而Vimentin蛋白的表达水平受到明显抑制(P<0.05)。此外,转染组PC3和DU145细胞的侵袭和迁移能力相比于NC组显著下降(P<0.05)。双荧光素酶报告基因验证结果显示,ZEB2基因的3’-UTR存在miR-200c-3p的结合位点,证明其是受到miR-200c-3p直接调控的靶基因。结论:结合实验结果,我们认为miR-200c-3p很可能在前列腺癌中发挥肿瘤抑制的作用,而ZEB2是miR-200c-3p的直接靶基因之一。在PC3和DU145细胞中过表达miR-200c-3p可显著抑制ZEB2蛋白的表达,进而阻碍前列腺癌细胞EMT的进展。因此,miR-200c-3p作为前列腺癌进展过程中的一个关键因素具有十分重要的研究意义,未来有希望作为前列腺癌临床诊断的分子标志物。