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目的:动脉血氧水平的波动是早产儿视网膜病变发生的主要因素，然而血氧浓度的变化在ROP发病中的作用机制尚不明确。本研究制备血氧浓度波动所致新生大鼠增生性视网膜病变的模型，检测血管内皮生长因子(VEGF)及其受体Flk-1(VEGFR-2)的表达，并进一步探讨早产儿视网膜病(ROP)的发病机制。
方法:208只新生SD大鼠，随机分为氧气组和对照组，每组各104只，采用免疫组织化学方法以及逆转录聚合酶链反应技术(reversetranscription-polymerasechainreaction，RT-PCR)，观察生后14d、18d、25d视网膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)及Flk-1(VEGFR-2)的蛋白和mRNA表达水平。并且在氧气暴露后4天观察视网膜血管的改变情况。取出视网膜，运用ADP酶染色的组织化学方法进行视网膜铺片，染色，拍照，并且测量视网膜无血管区的面积。制作视网膜组织石蜡切片，进行苏木素-伊红(Hematoxylin&Eosin，HE)染色并且计数突破视网膜内界膜的血管内皮细胞，观察视网膜外血管增生情况。数据资料用均数±标准差(-x±s)表示，使用SAS8.1统计软件。采用双因素方差分析和成组t检验方法进行统计。P＜0.05判定为差异有显著性。
结果:①氧气组18d幼鼠视网膜无血管面积明显大于空气组(P＜0.05)，且突破内界膜的内皮细胞核数目明显多于空气组(P＜0.05)，表明模型建立成功。②氧气组在14d时视网膜VEGF及Flk-1表达明显强于对照组(P＜0.05)。氧气组VEGF及Flk-1阳性表达持续增强，在18d时表达最强，与14d及25d比较，表达强度差异均有显著意义(P＜0.05)，且与对照组18d相比差异有显著性意义(P＜0.05)。氧气组VEGF及Flk-1阳性表达在25d明显减弱，差异与对照组无显著意义(P＞0.05)。③氧气组视网膜组织VEGF-mRNA及Flk-1-mRNA表达水平在14d和18d均明显高于对照组(P＜0.05)。25d时氧气组VEGF-mRNA及Flk-1-mRNA表达水平均下降，与对照组无显著差异(P＞0.05)。
结论:反复血氧浓度的波动可导致新生大鼠视网膜血管增生性病变，血管增生性视网膜组织中VEGF及Flk-1表达明显增强，提示VEGF及Flk-1在ROP病理过程中起着重要媒介作用。本研究还提出，ROP视网膜血管增生过程中存在一种正反馈机制即VEGF与Flk-1的上调协同作用，共同促进视网膜新生血管的形成，进一步探讨血氧浓度波动在ROP病理过程中的作用机制。