【摘 要】
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目的:通过建立ApoE-/-糖尿病肾病小鼠模型,探究黄芪汤(Huangqi decoction,HQD)对STZ诱导的糖尿病肾病小鼠的肾脏保护作用及其相关作用机制。方法:8周龄的雄性ApoE-/-小鼠腹腔注
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目的:通过建立ApoE-/-糖尿病肾病小鼠模型,探究黄芪汤(Huangqi decoction,HQD)对STZ诱导的糖尿病肾病小鼠的肾脏保护作用及其相关作用机制。方法:8周龄的雄性ApoE-/-小鼠腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ),剂量为55mg/kg,连续注射5天,两周后血糖>15mmol/L的小鼠视为造模成功,造模成功的小鼠被随机分为5组:正常组、模型组、模型+HQD组、模型+Compound C组和模型+HQD+Compound C组,Compound C为AMPK特异性抑制剂,于小鼠处死前两周经腹腔注射给予,剂量为20mg/kg,HQD(1.08g/kg)灌胃给药8周后处死所有小鼠。小鼠处死时留取血清和肾脏样本。检测各组小鼠一般参数指标(体重、血糖及24h尿量等)、肾功能指标、肾脏炎症指标及组织病理变化;采用免疫组化、免疫荧光和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测AMPK/m TOR信号通路以及自噬相关信号通路蛋白分子的表达情况。结果:1.黄芪汤可明显改善ApoE-/-糖尿病肾病小鼠的一般参数指标(体重、血糖及24h尿量等),降低ACR、BUN和血肌酐的同时缓解肾脏炎症,减轻DN引起的肾脏病理损害。2.黄芪汤可通过上调AMPK表达抑制m TOR的过度活化,激活ULK1复合物以及下游的自噬信号通路,使自噬相关蛋白ULK1、LC3Ⅱ和Beclin-1表达,p62、p-m TOR等蛋白表达减少,进而改善DN引起的自噬受损来起到保护肾小球、延缓DN发展的作用。结论:1.黄芪汤可以改善DN小鼠的体重、血糖、日饮水量以及24h尿量等一般指标,并具有减少蛋白尿、降低BUN和血肌酐值、缓解肾脏病理损伤和减轻肾脏炎症以及保护肾小球足细胞的作用,这些作用机制与AMPK/m TOR信号通路相关。2.黄芪汤可以通过上调AMPK表达,改善DN导致的肾脏内自噬受损,进而达到缓解DN病情发展的作用。
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