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本研究通过2个试验系统的研究了在全混合日粮（TMR，精粗比60:40）中添加三种水平的活性干酵母（ADY，活菌数≥2.0×1011CFU/g）对荷斯坦泌乳牛生产性能、营养物质消化率、血液指标、瘤胃发酵和细菌群落的影响，以期进一步扩充活性酵母使用效果的数据，为其在奶牛生产中的合理应用提供理论参考。 试验一：选择45头中国荷斯坦泌乳牛，按体重、胎次、泌乳天数、产奶量和乳成分相同或相近的原则，随机分为3个处理组，每组15头，研究日粮中添加不同水平的ADY对荷斯坦泌乳牛生产性能、营养物质消化率、血液指标及瘤胃发酵的影响。试验处理按ADY添加水平分：对照Y0组饲喂基础日粮，试验Y2组和Y5组每头牛分别在基础日粮上添加ADY量为2g/d和5g/d。试验预饲期7天，正式期60天，并于试验结束后完成各项指标的检测。试验结果表明：1）Y5组干物质采食量、产奶量和4%乳脂校正乳分别较对照Y0组显著提高1.23kg/d，0.99kg/d和1.92kg/d（P<0.05），每天每头牛可额外收益3.25元；2）与对照Y0组相比，Y5组瘤胃丙酸浓度显著增加（P<0.05），乙酸与丙酸的摩尔比显著降低（P<0.05）；3）Y2组干物质采食量和产奶量高于对照Y0组（P>0.05），乳成分和瘤胃发酵参数无显著变化（P>0.05)，每天每头牛可额外收益1.69元；4）奶牛各营养物质表观消化率和血液指标未受ADY添加水平的影响（P>0.05）。上述结果表明，日粮中每头牛添加5g/d的ADY可改善荷斯坦泌乳牛的瘤胃发酵功能，提高采食量和泌乳性能。 试验二：借助高通量测序技术研究添加不同水平的ADY对荷斯坦泌乳牛瘤胃细菌多样性和群落组成的影响。试验动物及试验设计同试验一。在试验正式期的最后一天，从3个处理组中共抽取试验牛38头，于晨饲前通过口腔导管法收集瘤胃液10ml，立即-80℃超低温保存。随后抽取1.5ml解冻处理的样品，完成总DNA的提取及PCR扩增，经IlluminaMiSeq高通量测序平台对瘤胃细菌16SrRNA基因进行聚类比对分析后，共产生1679个OTUs，784543条序列。统计分析结果表明：1）添加ADY增加了奶牛瘤胃细菌的Chao1（丰富度）和Shannon（多样性）指数（P>0.05）；2）在门水平上，拟杆菌门（Bacterodetes）、硬壁菌门（Firmicutes）和变形菌门（Proteobacteria）占主导地位；在属水平上，Prevotella-1、Succinivibrionaceae_UCG-001和Prevotella-7为优势菌；3）与对照Y0组相比，Y5组瘤胃Firmicutes的相对丰度增加，Proteobacteria的相对丰度减少（P>0.05），而乳酸产生菌Succinivibrionacea_UCG-001的相对丰度显著减少（P<0.05）；4）与其他各处理组相比，Y2组变形菌门、琥珀酸孤菌科Succinivibrio相对丰度增加（P<0.05)，Y5组硬壁菌门、毛螺菌科专一半纤维降解菌Marvinbryantia的相对丰度增加（P<0.05)。以上结果表明，添加ADY可一定程度上增加奶牛瘤胃细菌的丰富度和多样性。添加5g/d的ADY通过减少Proteobacteria乳酸产生菌Succinivibrionacea_UCG-001的相对丰度，稳定瘤胃发酵内环境，同时增加瘤胃Firmicutes半纤维降解菌Marvinbryantia的相对丰度，促进奶牛对纤维物质的消化，进而提高生产性能。 综合本研究的结果，TMR中添加2g/d的ADY对奶牛的影响相对较小。添加5g/d的ADY能提高荷斯坦泌乳牛瘤胃丙酸浓度，降低乙酸与丙酸的摩尔比，提高干物质采食量和产奶量，并且具有可观的经济效益。此外，ADY对荷斯坦泌乳牛瘤胃发酵环境及生产性能的改善与瘤胃相关细菌群落的改变有关。