枸杞多糖在秀丽线虫中延缓衰老的实验研究

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衰老是机体生命过程中不可避免,由诸多因素共同调节的自发生物过程。随着全球老龄化问题的日益严峻,衰老或干预衰老的相关研究受到越来越多的关注。枸杞多糖(LBP)是一种因具有调节血糖血脂、增强抗氧化能力等多种功能而备受关注的天然产物之一,这些功能表明它在干预衰老方面具有较大潜力。本文以秀丽隐杆线虫为模式生物,开展了枸杞多糖在秀丽线虫中延缓衰老的系列实验研究。分别对枸杞多糖在线虫的寿命和健康中作用进行了实验;利用突变株线虫、RNAi和RT-PCR等技术,实验上分析了枸杞多糖延缓线虫衰老的可能分子机制。取得了以下成果:(1)在线虫寿命实验方面,发现浓度分别为50 μg/ml、100 μg/ml、200 μg/ml、300 μg/ml、400μg/ml、500 μg/ml的枸杞多糖,均可以延长秀丽隐杆线虫寿命,其中浓度为300 μg/ml时效果最佳,即随着枸杞多糖浓度的变化,秀丽隐杆线虫的寿命呈非线性的变化,存在着一个极大值;在25℃培养温度下,可以延长平均寿命20.72%。通过不同温度、不同给药时期的秀寿命实验和子代寿命实验,发现枸杞多糖可以不依赖特定温度、不依赖特定给药时期来延长秀丽隐杆线虫寿命,并且这种延长寿命效果没有明显的遗传倾向。(2)在线虫健康实验方面,通过环境应激实验,发现枸杞多糖可以增强线虫在高温、强氧化、重金属污染等环境因素刺激下的生存能力,并且不损害秀丽隐杆线虫的高渗透压应激能力。通过秀丽隐杆体内ROS、CAT、SOD含量水平实验测量,发现枸杞多糖显著增强蠕虫的抗氧化能力,300 μg/ml LBP组体内ROS、CAT、SOD含量水平相对于对照组分别为0.49±0.05、1.80±0.08、2.22±0.2,显著提高CAT和SOD的活性并减少ROS的积累,这与枸杞多糖增强线虫环境应激能力相互印证。通过不同温度时秀丽隐杆线虫的子代数目实验和不同时间点的运动能力测试,发现枸杞多糖还可以显著增强秀丽隐杆线虫的生殖能力和运动能力。(3)实验上揭示出了枸杞多糖延长线虫寿命的分子机制:枸杞多糖通过sir-2.1延长寿命时,需要依赖daf-16,枸杞多糖延长秀丽隐杆线虫寿命需要依赖胰岛素/IGF-1信号通路;枸杞多糖延长寿命还需要daf-12参与;即枸杞多糖延长秀丽隐杆线虫寿命需要sir-2.1的参与,枸杞多糖主要通过daf-12和daf-16基因通路来延长秀丽隐杆线虫寿命。本文的研究成果,为进一步开发和利用枸杞多糖作为功能食品和药品,并用于干预衰老或干预老年相关疾病提供了一定的研究基础。
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