P物质对人体增生性瘢痕成纤维细胞生物学作用的实验研究

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增生性瘢痕(hypertrophic scar,HS)是人类皮肤受损后出现的一种病理现象,更是烧伤后康复的一大难题,其发病机制至今尚不十分清楚。越来越多的研究表明,免疫和炎性因素在HS的形成中具有重要作用。作为第一个被发现的神经肽,P物质(substance P,SP)在创伤愈合中的作用也逐渐引起人们的关注。有证据表明,HS内存在大量的SP阳性神经,SP可以趋化免疫和炎性细胞,并且促进其增殖及释放细胞因子,导致HS的形成。成纤维细胞作为创伤修复过程中重要的功能细胞和HS组织中主要的细胞成分,在HS的形成和发展中有着重要的地位。但目前SP对HS中成纤维细胞作用的研究还未见报道。本实验的目的旨在通过对HS的成纤维细胞中SP的检测以及观察SP对其增殖、胶原代谢和形态学的影响,探讨SP对HS中成纤维细胞的作用和在HS形成中的作用机制,为HS的防治拓展新的领域。为此,本研究应用免疫组化法对HS成纤维细胞中的SP进行检测,并与正常皮肤做比较;用细胞计数及MTT法研究SP对HS成纤维细胞增殖及活力的影响;用3H-脯氨酸参入及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测SP对HS成纤维细胞胶原代谢的影响;并用光镜和电镜进行形态学的对比研究。结果显示,HS成纤维细胞中的SP阳性率明显高于正常皮肤;SP作用后,HS中成纤维细胞数量明显增加,作用组的OD值明显高于非作用组;SP作用组3H-脯氨酸参入的CPM值明显高于对照组,胶原酶活性降低;形态学上可见细胞增殖明显,细胞器功能增强。结论:1.HS成纤维细胞中SP的表达较正常皮肤显著增加,提示SP参与了HS的形成过程;2.SP可以促进HS成纤维细胞增殖和活力增加,<WP=8>提示SP可直接作用成纤维细胞,通过增强其数量和功能来促进HS的形成;3.SP增加3H-脯氨酸摄入,降低胶原酶活性提示SP通过促进成纤维细胞的胶原合成增加和降低胶原酶活性抑制胶原降解两条途径破坏胶原代谢平衡,导致HS的形成。4.P物质可以直接影响HS成纤维细胞的超微结构,从而引起细胞功能的改变。
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