目的:　　 1.针对肺炎链球菌的荚膜基因，设计引物序列，建立起准确、快速的血清分型新方法。　　 2.了解肺炎链球菌各毒力基因的携带情况。　　 3.研究肺炎链球菌（侵袭性与非侵袭性）刺激巨噬细胞后对炎症小体激活的影响状况。　　 方法:　　 1.收集温州医学院附属第二医院2012年1月至8月的痰液、脓液、血液、脑脊液、胸水等临床标本，通过Optochin敏感试验，胆汁溶菌试验，经VITEK2 COMPACT型全自动细菌分析仪对收集的标本进行再验证。　　 2.采用连续多重PCR技术，分7个反应，对肺炎链球菌的荚膜进行血清分型。　　 3.采用PCR方法对前4位的肺炎链球菌荚膜血清型(19F，6A/B，19A，23F)DNA进行三个毒力基因(psaA、ply、lytA)的检测。　　 4.培养THP-1细胞，经100ng/ml浓度的PMA刺激转化为巨噬细胞，计数至5.0×105/ml，吸取1.0ml巨噬细胞加入到4个12孔细胞培养板中，再向其中加入100μl浓度为1.0McFarland的肺炎链球菌（侵袭性与非侵袭性）作为实验组，100μl生理盐水作为对照组，均置37℃5％～7％CO2孵箱中分别孵育0h、2h、4h和8h，吸出细胞悬液至EP管，4000rpm离心10min取上清液，用ELISA法检测上清液中Caspase-1、IL-1β和IL-18的浓度。　　 结果:　　 1.收集的98株菌株均为肺炎链球菌，其中侵袭性肺炎链球菌共6株，4株来自脑脊液，1株来自血液，1株来自胸水，其余的92株均为非侵袭性肺炎链球菌，都来自痰液。　　 2.共检出9种血清型，分别是19F，6A/B，19A，23F，15B，3F，14，1，15A，共85株，检出率86.7％(85/98)，前3个反应检出率为79.6％(78/98)，其中19F型检出率38.8％(38/98)，6A/B型检出率18.4％(18/98)，19A型检出率11.2％(11/98)，23F型检出率8.2％(8/98)，15B型检出率4.1％(4/98)，3F型检出率3.0％(3/98)，14型检出率1.0％(1/98)，1型检出率1.0％(1/98)，15A型检出率1.0％(1/98)。　　 3.前4种血清型(19F，6A/B，19A，23F)肺炎链球菌均100％携带psaA、ply、lytA毒力基鼠。　　 4.经PMA诱导的THP-1细胞由悬浮生长变为贴壁生长。　　 5.Caspase-1、IL-1β、IL-18的浓度均随时间的增加而呈现增高趋势，侵袭性肺炎链球菌组、非侵袭性肺炎链球菌组与生理盐水组在同一个时间点比较，侵袭组和非侵袭组的Caspase-1、IL-1β、IL-18的浓度均高于生理盐水组的浓度(P＜0.05)，侵袭性组Caspase-1的浓度高于非侵袭性组的浓度(P＜0.05)，而IL-1β、IL-18的浓度在这两组间没有差异性(P＞0.05)。　　 结论:　　 1.本院肺炎链球菌血清型以19F，6A/B，19A，23F四型为主，19F型最多，连续多重PCR前3个反应就能确定大部分菌株的血清型。　　 2.肺炎链球菌中普遍存在psaA、ply、lytA三个毒力基因。　　 3.经PMA诱导，THP-1细胞由悬浮生长变为贴壁生长的巨噬细胞。　　 4.肺炎链球菌刺激巨噬细胞，能激活炎症小体，调节caspase-1活性，使细胞上清液中Caspase-1、IL-1β和IL-18的浓度增加。