论文部分内容阅读
本论文以大田生长和离体培养的非洲菊舌状花为材料,初步研究了激素在非洲菊舌状花生长过程中的作用,克隆了GEXP并检测了GEXP和GXET基因在生长过程中的时空表达。主要结果如下:
1.在本实验室已获得GA3促进舌状花花瓣伸长结果的基础上,进一步测定了50 μmol.L-1GA3对舌状花离体培养过程中花瓣伸长、加宽、鲜重和干重的影响。实验表明,黑暗条件下,GA3明显促进花瓣伸长和鲜重的增加,但对加宽和干重无明显影响;光照条件下,GA3对伸长有促进作用,对加宽和干重有抑制作用,对鲜重无明显影响。舌状花生长的时间进程表明,CK照光后宽度的增加慢于长度的增加,照光后第4d加宽效果明显,而光照后伸长在第2d开始呈持续增加的趋势。黑暗下,GA3促进花瓣伸长的趋势与无激素处理光下的培养结果相似,但对加宽没有很明显的影响。
2.黑暗条件下,50 μmol.L-1 6-BA抑制了花瓣伸长和干重增加,对花瓣的加宽和鲜重有促进作用;光照条件下,6-BA明显抑制花瓣的伸长和干重增加,而对花瓣加宽和鲜重有微弱的促进作用。
3.无论在黑暗还是光照条件下,50 μmol.L-1 ABA都抑制了花瓣伸长、鲜重和干重的增加,对花瓣的加宽无明显影响。
4.GA3促进花瓣的花色素苷积累,6-BA和ABA抑制花色素苷积累。
5.利用生物信息学技术对非洲菊膨胀素基因(Expansin)的EST进行拼接,得到全长的Expansin cDNA序列,并利用PCR技术克隆得到GEXP基因,测序验证后在NCBI登记(EU199799,GEXP)。蛋白比对结果显示该基因编码的蛋白属于a类,且与其它物种中该类蛋白有较高同源性。进化树分析发现该基因与鱼尾菊、拟南芥、番茄、黄瓜中的膨胀素基因进化关系较近。
6.GEXP和GXET的时空表达分析表明,二者有相似的时期表达特征,其mRNA水平均在舌状花发育前期较低,中期较高,而花完全展开后下降:GEXP在花序不同部位如舌状花、苞叶、花梗及幼叶中有特异表达而GXET在不同部位表达水平相当。光照可提高GEXP与GXET基因的表达,GA3明显促进GEXP的表达,这与GA3促进舌状花花瓣伸展的时间进程相吻合,说明GEXP参与光与GA3调控花瓣的生长。6-BA和ABA处理后对GEXP表达无明显影响。