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NF-κB(nuclearfactorκB)是一种在哺乳动物细胞中广泛表达的核转录因子,在机体的许多生理过程中发挥着重要的作用,比如先天免疫的应答与炎症因子的分泌、细胞的增殖与分化、细胞的衰老和凋亡以及肿瘤的发生和发展等。当细胞处在静息的状态时,NF-κB的抑制因子IκB(InhibitorofNF-κB)会与其结合,IκB会将NF-κB的核定位信号(Nuclear localization signal,NLS)掩盖,NF-κB无法进入细胞核启动下游信号的应答,信号通路不表现生理功能;当机体受到外界条件的刺激或者NF-κB的激活因子肿瘤坏死因子α(TumorNecrosisFactorα,TNFα)和白介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)与细胞膜表面的受体相互结合时,细胞内的信号就会被活化,经过信号在细胞内的向下游传递,抑制因子IκBα就会依次被磷酸化和泛素化,最后被蛋白酶体降解,从而暴露出NF-κB的核定位信号,使NF-κB入核并启动下游基因的转录,进而发挥生理功能。先天免疫研究领域对于NF-κB信号通路的研究一直很多,重要的节点蛋白相继被发现,但是在这些节点蛋白之间是如何进一步将信号向下游传递的,中间是否存在其他辅助的蛋白因子等,还有很多问题需要去揭示。
ASB(Ankyrin Repeatand SOCS Box)蛋白家族主要包含18个成员,命名为ASB1到ASB18,从属于SOCS(Suppressor of cytokine signaling)蛋白超家族。ASB蛋白家族含有SOCS结构域,一般扮演着抑制细胞因子信号通路的角色。我们在利用二代人源CRISPR/Cas9文库筛选调节干扰素IFN-β(Interferon-β)信号通路的基因时发现了ASB1,该基因位于上调IFN-β的富集区。经过实验发现,过表达ASB1基本不影响仙台病毒(Sendai Virus,SeV)诱导的IFN-β调节因子(Interferon Regulatory Factor,IRF)3和7的激活水平,但能够上调TNFα和IL-1β诱导的NF-κB的激活水平并且能够提高下游相关基因的转录水平,而将内源性ASB1敲除之后则出现了相反的结果。免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)实验和激光共聚焦实验证明,ASB1与NF-κB信号通路中重要的节点蛋白TAB2存在相互作用。进一步实验证明,ASB1能够通过其AnkyrinRepeat结构域与TAB2的中间区段(530-665位氨基酸)相互结合,并且内源性的ABS1与TAB2/TAB3/TAK1复合体存在相互作用,当用TNFα和IL-1β进行刺激时,这种结合作用进一步增强。同时,过表达ASB1能够促进IκBα的磷酸化,IκBα磷酸化后被降解,IκBα的总量减少,从而NF-κB被激活。此外,ASB1缺失型小鼠在细菌的脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)刺激下的炎症反应减弱。综上所述,我们有可能发现了ASB1的新功能,作为SOCS蛋白超家族的成员之一,它可能在NF-κB信号的激活过程中发挥着正调控的作用,这也为接下来更好地研究TNFα和IL-1β激活NF-κB信号通路的机制提供了一些新思路。
ASB(Ankyrin Repeatand SOCS Box)蛋白家族主要包含18个成员,命名为ASB1到ASB18,从属于SOCS(Suppressor of cytokine signaling)蛋白超家族。ASB蛋白家族含有SOCS结构域,一般扮演着抑制细胞因子信号通路的角色。我们在利用二代人源CRISPR/Cas9文库筛选调节干扰素IFN-β(Interferon-β)信号通路的基因时发现了ASB1,该基因位于上调IFN-β的富集区。经过实验发现,过表达ASB1基本不影响仙台病毒(Sendai Virus,SeV)诱导的IFN-β调节因子(Interferon Regulatory Factor,IRF)3和7的激活水平,但能够上调TNFα和IL-1β诱导的NF-κB的激活水平并且能够提高下游相关基因的转录水平,而将内源性ASB1敲除之后则出现了相反的结果。免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)实验和激光共聚焦实验证明,ASB1与NF-κB信号通路中重要的节点蛋白TAB2存在相互作用。进一步实验证明,ASB1能够通过其AnkyrinRepeat结构域与TAB2的中间区段(530-665位氨基酸)相互结合,并且内源性的ABS1与TAB2/TAB3/TAK1复合体存在相互作用,当用TNFα和IL-1β进行刺激时,这种结合作用进一步增强。同时,过表达ASB1能够促进IκBα的磷酸化,IκBα磷酸化后被降解,IκBα的总量减少,从而NF-κB被激活。此外,ASB1缺失型小鼠在细菌的脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)刺激下的炎症反应减弱。综上所述,我们有可能发现了ASB1的新功能,作为SOCS蛋白超家族的成员之一,它可能在NF-κB信号的激活过程中发挥着正调控的作用,这也为接下来更好地研究TNFα和IL-1β激活NF-κB信号通路的机制提供了一些新思路。