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研究背景创伤性休克后血脑屏障(Blood-brain Barrier,BBB)的动态损伤不明确;BBB损伤是否由NF-κB调控亦需进一步研究;新型高选择性胆碱受体阻滞剂盐酸戊乙奎醚(Penehyclidine Hydrochloride,PHC)是否对创伤性休克后BBB损伤有保护作用及具体作用机制仍值得探讨。在前期研究基础上,本课题旨在探讨创伤性休克后血脑屏障通透性动态变化规律、NF-κB信号通路对其的调控作用以及PHC的保护作用及分子机制。第一章 大鼠创伤性休克早期血脑屏障通透性动态变化[目的]探讨创伤性休克后早期BBB通透性动态变化规律。[方法]复制创伤性休克大鼠模型。大鼠分为5组:Con、Shock、LR1h、LR2h、LR6h组。检测各组脑组织含水量、荧光素钠含量,电镜观察超微结构,qPCR法和Western blot法分别检测NKCC1、VEGF、Occludin、Claudin-5mRNA和蛋白表达以及NF-κB p65蛋白表达。[结果]1.与con组比较,Shock组脑组织含水量和荧光素钠含量显著增加,血脑屏障超微结构受损,NKCC1、VEGF和p65表达显著增加,而occludin、claudin-5表达降低。2.创伤性休克常规乳酸林格液复苏后6h内,随时间延长,脑组织含水量和荧光素钠含量递增,血脑屏障超微结构病理损害加重,NKCCI、p65表达递增,而occludin、claudin-5 表达递减。3.常规乳酸林格液复苏后VEGF表达峰值与BBB通透性损伤变化趋势不同步。4.NF-κB p65蛋白表达在复苏后6h内呈递增趋势,与BBB通透性变化吻合。[结论]创伤性休克及常规复苏后6h内,BBB通透性随时间延长而损伤加重,跨细胞途径和细胞旁途径均有受损,而VEGF和NF-κB可能均参与了BBB通透性动态损伤的病理过程。第二章 NF-κB信号通路在创伤性休克后血脑屏障通透性改变中的调控作用[目的]探讨NF-κB信号通路在创伤性休克后BBB通透性变化中的调控作用。方法:大鼠分为4组:Con组、Shock组、LR6h组、PDTC6h组。其余方法同第一章。[结果]与LR6h组比较,PDTC6h组脑组织含水量和荧光素钠含量明显降低,NKCC1、VEGF和p65表达显著下降,而occludin、claudin-5表达显著增加。[结论]NF-κB通过调控细胞旁途径和跨细胞途径双重途径,直接参与了创伤性休克后继发BBB通透性损伤的病理过程。第三部分 盐酸戊乙奎醚(PHC)对创伤性休克后血脑屏障的保护作用及可能机制[目的]探讨PHC对创伤性休克后BBB的保护作用及可能机制。[方法]大鼠分4组:Con组、Shock组、LR6h组、PHC6h组。其余方法同第一章。[结果]与LR6h组比较,PHC6h组脑组织含水量和荧光索钠含量明显降低,NKCC1、VEGF和NF-κB p65表达显著下降,而occludin、claudin-5 表达增加。[结论]PHC能明显减轻创伤性休克后BBB损伤,涉及跨细胞及细胞旁途径,其机制不仅通过抑制VEGF表达,还与抑制NF-κB活化有关。