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瓜叶菊(Senecio cruentus L’Herit)是菊科(Compositea)千里光属(Senecio)的一种观赏价值很高的多年生花卉,花期正值少花的冬春季节(12月—翌年4月),是重要的节日花卉,具有极高观赏价值和经济价值。其花色丰富,是研究花色形成机理的优良材料。bHLH是高等植物中重要的转录因子,其对花青素合成途径上的结构基因具有调节作用。本文作者对瓜叶菊的研究主要获得了如下结果:(1)建立了瓜叶菊稳定的再生体系。以瓜叶菊’Jester’系列5个花色品种的种子为外植体,MS为基本培养基,筛选出了瓜叶菊试管培养所需的培养基中最佳生长素种类及浓度,获得了经叶片再生的试管苗。结果表明:不同外植体、生长调节剂种类及浓度均影响植株再生。叶片再生能力优于叶柄;诱导丛生芽效果最好的培养基配方为MS+6-BA2.0 mg/L;诱导愈伤组织增殖的最佳培养基为MS+NAA1.0 mg/L+6-BA1.0mg/L;经叶片诱导不定芽再生的最佳培养基为MS+6-BA2.0 mg/L+NAA2.0 mg/L;不定芽生根培养基以添加0.5 mg/L NAA的1/2MS为佳。试管苗出瓶后,经过适宜培养,获得了健壮的开花植株。利用RHSCC比色和使用色差仪(NF333)对再生植株花色表型进行量化测定后发现,5个色系的种子建立的再生株系花色均稳定。(2)初步探讨了瓜叶菊遗传转化体系。以粉色瓜叶菊叶片和再生不定芽为外植体,MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 2.0mg/L为培养基,分别添加不同浓度的卡那霉素,确定抗生素的临界浓度,试验结果表明,10 mg/L的硫酸卡那霉素可以有效抑制叶盘的分化和不定芽根的发育。(3)利用RT-PCR技术,从蓝色瓜叶菊Ⅱ级舌状花中分离得到了两个编码bHLH转录因子同源序列的片段,分别命名为bHLH-1 (390bp)和bHLH-2 (227bp),序列分析表明:其分别编码130和75个氨基酸序列。采用半定量RT-PCR的方法对bHLH-1和bHLH-2在瓜叶菊中的表达模式进行分析发现,这两个片段在不同花色的Ⅰ级和Ⅱ级舌状花及根、茎、叶、管状花中均有表达,且表达量相似,说明分离得到的这两个bHLH片段的基因在瓜叶菊中是组成型表达的。