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背景肝细胞生长因子(Hepatocyte growth factor,HGF)具有较强的促血管生成作用,目前构建的人肝细胞生长因子重组腺病毒(Adenovirus vector encoding HGF gene, Ad-HGF)已进入临床Ⅱ期心肌缺血和骨骼肌缺血治疗并获良好评价而居国际领先地位。转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)为脑动脉粥样硬化(Cerebral atherosclerosis,CAS)关键因子,与HGF的相互作用效应依细胞环境、不同细胞及细胞内主要活性因子不同而不同,我们推测外源性HGF可能重建老龄CAS状态下HGF-TGF-β1平衡而对脑血管新生可能具有重要调控作用。目的通过蛛网膜下腔注射外源性Ad-HGF观察其促脑血管新生和神经保护的作用,探讨HGF-TGF-β1相互间作用关系与促老龄CAS大鼠脑血管新生的相关性。方法我们采用高血压合并高血脂喂养法构建老龄脑动脉粥样硬化大鼠模型。通过蛛网膜下腔注射不同剂量Ad-HGF,分别于第10d、20d、30d抽取脑脊液后处死大鼠后取脑组织,通过免疫荧光法观察脑组织中CD31表达情况；通过免疫组织化学染法观察脑组织中胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acid protein,GFAP)及HGF、TGF-β1表达情况；通过酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunoadsorption assay, ELISA)检测脑脊液中HGF、TGF-β1浓度；免疫蛋白印迹法(western blotting, WB)法检测脑组织中HGF、TGF-β1蛋白表达情况。结果1、大鼠血压、血脂值明显高于实验前,颈部血管HE染色可见粥样斑块形成。2、在大鼠脑室内的脉络膜细胞及双侧侧脑室壁均可见荧光蛋白的表达,表达时间持续2w左右。3、同一时间点,随着Ad-HGF剂量的增加,脑组织中CD31阳性细胞数逐渐增加,CD31阳性细胞数呈一定剂量依赖性,差异均有显著性(F10=34.365, P10<0.001; F20=144.791, P20<0.001;F30=73.832, P30<0.001)。4、同一时间点,随着Ad-HGF剂量的增加,脑组织中GFAP阳性细胞数逐渐增加,GFAP阳性细胞数呈一定剂量依赖性,差异均有显著性(F10=182.174, P10<0.001; F20=409.529, P20<0.001; F30=278.386, P30<0.001)。5、同一时间点,随着Ad-HGF剂量的增加,脑组织中HGF平均光密度值逐渐增加,HGF平均光密度值呈一定剂量依赖性,差异均有显著性(F10=3309.945,P10<0.001；F20=2799.429, P20<0.001; F30=1715.945, P30<0.001)。同一时间点,随着Ad-HGF剂量的增加,脑组织中TGF-β1平均光密度值逐渐增加,TGF-β1平均光密度值呈一定剂量依赖性,差异均有显著性(F10=7542.409, P10<0.001; F20=7895.557, P20<0.001; F30=15142.692, P30<0.001)。6、酶联免疫吸附法(ELISA)检测：同一时间点,随着Ad-HGF剂量的增加,脑脊液中HGF浓度值逐渐增加,HGF浓度值呈一定剂量依赖性,差异均有显著性(F1o=375.347, P10<0.001; F20=394.235, P20<0.001; F30=181.834, P30<0.001)。同一时间点,随着Ad-HGF剂量的增加,脑脊液中TGF-β1浓度值逐渐降低,TGF-β1浓度值呈一定剂量依赖性,差异均有显著性(F10=58.223, P10<0.001; F20=43.319, P20<0.001; F30=64.199, P30<0.001)。7、同一时间点,随着Ad-HGF剂量的增加,脑组织中HGFOD值逐渐增加,HGFOD值呈一定剂量依赖性,差异均有显著性(F10=399.659, P10<0.001; F20=295.420, P20<0.001; F30=302.797, P30<0.001)。随着Ad-HGF剂量的增加,脑组织中TGF-β1OD值逐渐增加,TGF-β1值呈一定剂量依赖性,差异均有显著性(F10=3096.724,P10<0.001; F20=663.090, P20<0.001; F30=34933.681, P30<0.001)。结论1、采用高血压合并高血脂喂养可成功建立大鼠CAS模型。2、HGF具有促血管新生作用。3.、外源性HGF可导致神经胶质细胞变化。4、外源性HGF可降低TGF-β1表达,对HGF促血管新生具有一定的促进作用。