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目的:本文以甘蔗叶为研究对象。研究甘蔗叶总黄酮的提取工艺,确定最佳提取工艺;测定甘蔗叶中总黄酮的含量;建立甘蔗叶高效液相色谱指纹图谱;进行甘蔗叶总黄酮提取物的抗炎作用研究。 方法:1.甘蔗叶总黄酮的提取工艺研究:以甘蔗叶总黄酮的含量为评价指标,以提取温度、提取时间、固液比和乙醇浓度为考察因素,采用L9(34)正交试验法优化甘蔗叶总黄酮提取工艺。2.甘蔗叶中总黄酮的含量测定:采用分光光度法,以芦丁为对照品,AlCl3为显色剂,在417nm处进行甘蔗叶总黄酮含量测定。3.甘蔗叶指纹图谱的建立:采用HPLC法对17个不同品种的甘蔗叶进行分析。通过色谱条件优化、方法学考察研究,确认共有峰,建立对照指纹图谱,确定各种技术参数,应用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004A版)计算指纹图谱的相似度。4.甘蔗叶总黄酮提取物的抗炎作用研究:采用不同类型的炎症小鼠模型,进行二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验、小鼠腹腔毛细血管通透性实验、小鼠棉球肉芽肿增生试验,观察甘蔗叶总黄酮的抗炎作用。 结果:1.优选出甘蔗叶总黄酮提取的最佳工艺:溶剂为70%乙醇,料液比1:25,提取温度80℃,每次2h。2.三氯化铝显色法测定甘蔗叶总黄酮平均含量6.77mg/g,平均回收率95.5%,RSD=1.5%.3.建立甘蔗叶HPLC的指纹图谱。确定了如下色谱条件:检测长:320nm,流动相:乙腈-0.1%冰醋酸,梯度洗脱,柱温:25℃,流速:1ml·min-1,在95min内记录甘蔗叶的指纹图谱。根据国家中药注射液指纹图谱研究的技术要求,确定14个共有峰,其中15个品种的甘蔗叶相似度大于0.9。4.甘蔗叶总黄酮提取物能明显抑制小鼠耳廓炎症,对醋酸所致的小鼠腹腔毛细血管通透性增高有显著的抑制作用,对小鼠棉球肉芽肿增生有显著的抑制作用。 结论:本研究所建立的甘蔗叶总黄酮提取工艺中,影响甘蔗叶总黄酮提取效率的主要因素为料液比,其次是提取温度;所建立的甘蔗叶中总黄酮的含量测定方法操作简便、准确,具有很好的重现性和稳定性;甘蔗叶总黄酮具有一定的抗炎作用;建立的HPLC指纹图谱有很好的稳定性、重现性、精密度,可用于甘蔗叶的鉴定。