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近年来,心肌缺血引起的心肌纤维化(MF)已成为临床上亟待解决的难题之一,研究和开发有效防治心肌纤维化的药物成为研究热点。瓜蒌薤白汤系中医临床经典处方,是治疗胸阳不振,气滞痰阻之胸痹证的基础方剂,近年来在缺血性心脏病的临床治疗中取得了满意疗效,但其具体作用机制尚不明确。本文通过整体动物和体外细胞培养实验,观察瓜蒌薤白汤对心肌纤维化的防治作用,并初步探索其作用机制,具体研究内容如下:
(1)采用结扎冠状动脉法制备大鼠心肌纤维化模型,手术后第7、14、21、28、35、42、49、56天分别处死;留取心脏标本,HE染色和Masson染色观察心肌组织病理形态,定量测定心脏组织羟脯氨酸含量、胶原容积分数(CVF)和转化生长因子β1(TGF-pi)的表达。
(2)按上述方法制备大鼠MF模型,给予瓜蒌薤白汤醇提物、瓜蒌薤白汤水提物组及瓜蒌薤白汤醇提物不同萃取部位后,观察心肌组织病理形态学变化,测定大鼠心脏体质量比值、左室心肌胶原容积分数和羟脯氨酸含量。
(3)对乳鼠心肌细胞和心肌成纤维细胞进行原代培养,观察瓜蒌薤白汤醇提物及正丁醇萃取物药液对CoCl2造成心肌细胞缺氧损伤的保护作用及TGF-β1诱导的CFs细胞增殖及羟脯氨酸的含量的影响。
结果表明:(1)结扎冠状动脉法能通过上调TGF-β1表达,升高左室心肌胶原容积分数和羟脯氨酸含量,成功制备大鼠心肌纤维化模型。
(2)瓜蒌薤白汤醇提物和正丁醇萃取部位能明显改善模型大鼠心肌病理形态,降低心肌组织CVF和羟脯氨酸含量,下调心肌组织TGF-pi和a-SMA的表达,降低I型胶原mRNA的含量,瓜蒌薤白汤水提物组与其他提取部位组与模型组相比无显著性差异。提示瓜蒌薤白汤可通过多环节发挥对心肌纤维化的防治作用。
(3)瓜蒌薤白汤醇提物及正丁醇萃取部位的药液可改善CoC12造成心肌细胞缺氧损伤,提高心肌细胞存活率,且能抑制TGF-β1诱导的心肌成纤维细胞增殖,抑制羟脯氨酸的含量。
实验结果提示:瓜蒌薤白汤对心肌纤维化具有防治作用,其机制可能与下调TGF-pi和a-SMA的表达,减少Ⅰ型胶原mRNA的含量有关。