青藏高原的高山环境具有强烈的日辐射、低温、疾风等不利于植物生长的生态条件。在长期的适应与进化中,植物形成了特殊的适应机制,抵御低温寒冻等不利环境条件的伤害。本文选择西藏的绵头雪莲花（Saussurea.laniceps Hand.-Mazz.）为研究对象,利用种芽及通过组织培养获得的组织培养苗及愈伤组织,研究绵头雪莲花在低温锻炼过程中组织结构、抗氧化酶、抗氧化物质、激素以及可溶性蛋白质等生理生化指标的变化,探索高山植物绵头雪莲花抗寒性形成的生理生化基础。主要研究结果如下: 1.植物结构对环境的适应性 采集的绵头雪莲花成熟植株较矮,密被长绵毛,头状花序被长绵毛所覆盖。实生苗和组织培养苗叶片较小,密被多细胞长绒毛,叶表皮与栅栏组织排列紧密,栅栏组织1-2层,叶柄中脉、海绵组织及茎的皮层形成丰富的气腔,同中生植物相比,叶片表皮气孔较多。组织培养苗与实生苗形态基本一致。 2.组织培养体系的建立 利用绵头雪莲花种子建立了系统的组织培养体系,获得了生长均一,长势良好的愈伤组织,愈伤组织继代的培养基为MS+BA_0.5+NAA₂;从愈伤组织分化出较为一致的组织培养苗,诱导不定芽分化的培养基为MS+BA_1.5+NAA_0.2。生根培养基为MS+NAA_0.2。 实验结果表明,低温有利于绵头雪莲花器官的分化和生长;愈伤组织和组织培养苗在适宜的低度条件下生长良好,温度从13-23℃逐渐升高,生长加快,培养室温度超过25℃时,其他植物生长良好,而绵头雪莲花的愈伤组织褐化,组织培养苗枯死,较大的温差是促进其生长的有利因子;低温也是试管苗移栽成活的限制因素。说明愈伤组织和组织培养苗具有野生绵头雪莲花喜低温的遗传特性。 将愈伤组织和组织培养苗用于绵头雪莲花抗寒性研究。根据愈伤组织的生长曲线,确定了进行低温处理的愈伤组织的继代培养时间为15-18天。 3.低温锻炼对绵头雪莲花抗冻性的影响 低温锻炼提高了绵头雪莲花（种芽、组织培养苗、愈伤组织）的抗冻性。组织培养苗在2℃、0℃低温锻炼7d后进行抗冻性（在-5℃、-10℃、-13℃处理30分钟）测定,发现2℃低温锻炼的植株电解质外渗率低于对照和0℃低温锻炼处理,因此绵头雪莲花组织培养苗2℃低温锻炼优于0℃。进而对组织培养苗在2℃低温锻炼（0d（CK）、3d、6d、9d、12d、15d;脱锻炼（昼夜23℃/20℃）3d、6d、9d）的不同