【摘 要】
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目的:从人小细胞肺癌细胞株H446中分离并鉴定出具有干细胞特性的侧群(SP)细胞,研究其生物学特征,为肿瘤干细胞的分离纯化奠定基础。方法:采用荧光激活细胞分选(FACS)技术分选
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目的:从人小细胞肺癌细胞株H446中分离并鉴定出具有干细胞特性的侧群(SP)细胞,研究其生物学特征,为肿瘤干细胞的分离纯化奠定基础。方法:采用荧光激活细胞分选(FACS)技术分选得到H446细胞中SP细胞和非侧群(NSP)细胞并检测纯度,观察形成悬浮肿瘤细胞球的能力,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及荧光定量PCR检测这两种细胞亚群中CD133、ABCG2、Nucleostemin mRNA水平。MTT法比较SP细胞、NSP细胞及未分选细胞体外增殖能力及耐药性差异,流式细胞仪检测体外分化能力,裸鼠成瘤实验检测体内成瘤能力。结果:1.荧光显微镜下H446细胞中Hoechst33342阴性细胞约为(5.1±0.2)%,流式细胞分选结果显示H446中SP细胞比例为(6.3±0.1)%;2. SP细胞在无血清培养基中形成悬浮肿瘤细胞球的能力强于NSP细胞;3. CD133、ABCG2在SP细胞中的表达是NSP细胞的(21.60±0.26)倍、(7.10±0.14)倍,差异有统计学意义(P<0.01);Nucleostemin在SP细胞中的表达是非SP细胞的(1.02±0.08)倍,差异无统计学意义(P>0.05) ;4. SP细胞体外增殖能力及耐药存活能力均明显强于NSP细胞及未经分选的细胞(P<0.01);5. SP细胞在体外可分化为NSP细胞,但NSP细胞在体外不可分化为SP细胞;6. SP细胞在裸鼠体内具有较强的致瘤性。结论:1.人小细胞肺癌细胞株H446中存在具有肿瘤干细胞性质的SP细胞。2. CD133、ABCG2可能是人小细胞肺癌干细胞的分子标志物。
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