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目的:建立对氧磷酶1(PON1)有机磷脂酶及芳香酯酶活性双试剂、可见光波长比色的检测方法,满足PON1两种酶活性的临床全自动检测,并探讨其在稳定性冠状动脉疾病(SCAD)中的应用价值, 方法:设计可见光波长底物建立PON1有机磷脂酶及芳香酯酶活性双试剂检测方法并对该检测方法进行分析性能评估。收集临床经筛选的初发稳定性冠脉疾病的样本130例,用新建立的检测方法检测PON1有机磷脂酶和芳香酯酶的活性,分析PON1两种酶活性在SCAD诊断及危险分层中的作用。 结果:成功建立了PON1有机磷脂酶及芳香酯酶全自动检测方法。PON1有机磷脂酶系统的分析性能检测如下:检测限为28.3 U/L;检测线性范围为49.5~668.0 U/L;可报告范围可达39.0~668.0 U/L;PON1有机磷脂酶活性在259.2 U/L和407.0 U/L的低、高值水平处批内精密度分别为1.2%和0.7%,批间精密度分别为2.8%和2.4%;且在血红蛋白浓度≤1.0 g/L、胆红素≤200μmol/L、脂肪乳≤2.0%时无干扰;检测335例健康成人血清PON1有机磷脂酶活性,参考区间为169.0~574.1 U/L。PON1芳香酯酶系统的分析性能检测如下:检测限为33.1 U/L;检测线性范围为47.9~355.8 U/L;可报告范围可达47.9~387.6 U/L;PON1芳香酯酶活性为166.4 U/L和364.5 U/L的低、高值水平处批内精密度分别为0.9%和0.5%,批间精密度分别为2.4%和2.0%;且在血红蛋白浓度≤2.0 g/L、胆红素≤100μmol/L、脂肪乳≤1.0%时无干扰;检测335例健康成人血清PON1芳香酯酶活性,参考区间为119.0~374.1 U/L。而稳定性冠脉综合症的患者两种酶活性(PON1有机磷脂酶活性:287.9±95.0 U/L,PON1芳香酯酶活性:184.5±30.9 U/L)与健康人对照组(PON1有机磷脂酶活性:365.6±69.6 U/L,PON1芳香酯酶活性:208.3±23.4 U/L)相比显著下降(P<0.05),且冠脉重度狭窄的患者比轻度狭窄的患者的芳香酯酶活性下降显著(重度狭窄:171.8±23.9 U/L,轻度狭窄:209.5±27.7 U/L,P<0.05)。研究还表明PON1有机磷脂酶及芳香酯酶与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的联合检测提高了SCAD的诊断灵敏度及特异性。 结论:本研究成功建立了PON1有机磷脂及PON1芳香酯酶活性的全自动检测方法,实现了PON1有机磷脂酶及芳香酯酶两种酶活性的定量、快速检测。检测方法的分析性能满足临床检测需求。PON1有机磷脂酶及芳香酯酶两种酶活性检测在初发稳定性冠脉疾病的诊断及危险分层中具有很好的临床应用价值。