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目的:探讨病毒性脑炎的常见病原及不同病原感染的临床特点,并比较PCR技术及ELISA技术在病毒性脑炎诊断中的临床应用价值。
方法:①选择病程2~5天符合临床病毒性脑炎诊断标准的病人(101例),收集脑脊液(Cerebrospinal fluid,CSF)作为病例组(下称脑炎组),并收集同期同地区非颅内感染儿童脑脊液100例作为对照组。病人主要来自遵义医学院小儿科病房,标本采集均在入院后24小时内完成,脑脊液标本即刻置于-70℃低温冰箱中保存。同时收集病人临床资料,分析不同病原感染病毒性脑炎的临床特点,包括发病年龄、季节,症状、体征及辅助检查等。②采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(Enzyme-linkedimmunosorbent assay,ELISA)对脑脊液标本进行常见的四种病毒特异性抗原检测,包括柯萨奇病毒(Coxsacki virus,COXV)、艾柯病毒(Echo virus,ECHOV)、单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus,HSV)及JE病毒(Japanese B encephalitis virus,JEV)。③采用聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)方法检测脑脊液中上述四种病毒的核酸。④用SPSS13.0软件进行统计学分析。
结果:①101例患者中,男55例,女46例,年龄最大者12岁,最小2个月,平均年龄42个月,发病年龄集中在42个月以内,36月以内患儿发病率高,占74.2%;发病季节集中在七、八、九月,占54.4%。②101例病人中有10例为重症病例,表现为:反复发热,抽搐,进行性意识障碍,头颅CT出现广泛性脑水肿,甚至出现脑出血,病情进展快。4例病人放弃治疗,2例死亡,4例幸存者有2例留有后遗症;临床表现中90%以上病人有发热,除单纯疱疹性脑炎多为重症病例外。③ELISA检测四种病毒特异性抗原,脑炎组总阳性率为51.4%(52/101)。其中,COXV阳性率为22.7%(23/101);ECHOV为13.8%(14/101);HSV为5.9%(6/101);JEV为8.9%(9/101)。对照组仅1例阳性(COXV)。④ PCR检测四种病毒总阳性率为61.3%(62/101),其中COXV为25.7%(26/101);ECHOV18.8%(19/101);HSV7.9%(8/101);JEV8.9%(9/101)。对照组1例阳性率(COXV)。两种方法病原检测总检出率为65.3%(66/101),有34.7%(35/101)四种病原均为阴性(病原不明)。⑤ PCR法及ELISA法检出率经x2检验,P<0.05,差异具有统计学意义,脑炎组与对照组通过两种方法检出率比较均P<0.05,组间差异具有显著性。⑥在10例重症病例中有7例检出HSV,2例为EVs,1例为三种病毒混合感染;10例重症患儿年龄在2月~13月之间,平均年龄7个月。
结论:① EVs(COXV及ECHOV)是儿童病毒性脑炎的主要病原,JEV仍占有一定比例;② HSV性脑炎多表现为重症病例,主要累及1岁以内小婴儿;③ PCR技术联合ELISA技术可作为病毒性脑炎病原学检查的可靠手段,PCR技术敏感性高于ELISA技术;④本研究儿童病毒性脑炎主要发生在夏季,3岁以下儿童发病最高。