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背景和目的非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD）疾病谱包括非酒精性单纯性脂肪肝（nonalcoholic fatty liver,NAFL）、非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholic steatohepatitis,NASH）和NASH相关肝硬化。就肝脏病变而言,NASH的进展风险较NAFL更大,更易进展为肝硬化,甚至肝癌。而且,现有证据表明,NAFLD与诸多的肝外并发症相关,如2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）、心脑血管事件、结直肠肿瘤等。尽管有研究探讨了NAFLD/NASH的胆汁酸和肠道菌群的变化,但尚无研究对NAFLD不同临床表型的胆汁酸和肠道菌群进行系统性的关联分析研究,而且,也无研究专门探讨胆汁酸和肠道菌群的变化对NAFLD疾病进展的影响。因此,本课题的目的是研究不同NAFLD表型的胆汁酸、肠道微生物的差异,分析胆汁酸与肠道菌群之间的关系,探究胆汁酸、肠道菌群在NAFLD的发生、进展中可能发挥的作用。方法通过建立NAFL、NASH、NAFL+T2DM、CCl4小鼠模型来模拟常见的NAFLD不同临床表型和发展阶段。使用胆汁酸靶向性代谢组学分析血清、肝脏以及盲肠内容物不同部位的胆汁酸改变,使用16s rDNA检测盲肠内容物微生物菌群,通过筛选NAFLD不同发展阶段差异胆汁酸和门水平、属水平的肠道菌群,进行相关性分析。结果代谢组学发现NAFLD不同表型的不同部位的胆汁酸存在明显改变。与NC组相比,NAFL组血清甘氨酸（glycocholic acid,GCA）、牛磺熊去氧胆酸（tauroursodeoxycholic acid,TUDCA）、牛磺去氧胆酸（taurodeoxycholic acid,TDCA）明显升高,去甲脱氧胆酸（nordeoxycholic acid,NorDCA）、7-ketoLCA明显降低;肝脏别石胆酸（allolithocholic acid,allo LCA）明显升高,甘氨鹅去氧胆酸（glycochenodeoxycholate,GCDCA）、甘氨熊去氧胆酸（glycoursodeoxycholic acid,GUDCA）、猪胆酸（hyocholic acid,HCA）、Nor CA、Nor DCA、6,7-diketo LCA、7-keto LCA明显降低;盲肠内容物Nor DCA、去氧胆酸（deoxycholic acid,DCA）明显升高,HCA、allo LCA、6,7-diketo LCA、Nor CA明显降低。与NC组相比,NASH组血清胆酸（cholic acid,CA）、鹅去氧胆酸（chenodeoxycholic acid,CDCA）、熊去氧胆酸（ursodeoxycholic acid,UDCA）、Nor DCA明显升高,牛磺猪去氧胆酸（taurohyodeoxycholic acid,THDCA）明显降低;肝脏CA、GCDCA、DCA、GUDCA、Nor CA、Nor DCA明显升高,ω-鼠胆酸（ω-muricholic acid,ωMCA）、6,7-diketo LCA明显降低;盲肠内容物Nor DCA、Nor CA明显升高,牛磺ω-鼠胆酸（tauroω-muricholic acid,TωMCA）、猪去氧胆酸（α-hyodeoxycholic acid,HDCA）明显降低。与NC组相比,NAFL+T2DM组血清GCA、DCA、TUDCA、THDCA、TDCA明显升高,7-keto LCA明显降低;肝脏DCA、UDCA、muro CA明显升高,CA、6,7-diketo LCA、7-keto LCA明显降低;盲肠内容物CA、CDCA、TUDCA、muro CA、HDCA、DCA、LCA明显升高,6,7-diketo LCA明显降低。与NC组相比,CCl4组血清CA、CDCA、UDCA、TCA、GCA、TUDCA明显升高;肝脏GCA、TCA、THDCA、UDCA、HDCA、TUDCA明显升高;盲肠内容物甘氨猪去氧胆酸（glycohyodeoxycholate,GHDCA）、THDCA、TUDCA明显升高,GCA明显降低。肠道微生物分析发现NC组、NAFL组、NASH组和NAFL+T2DM组的肠道菌群主要由厚壁菌门、拟杆菌门、疣微菌门构成。NC组和CCl4优势菌群是厚壁菌门、拟杆菌门和变形菌门。在门水平,与NC组相比,NAFL组的厚壁菌门、放线菌门丰度升高,而拟杆菌门、变形菌门丰度明显降低。NASH组的放线菌门的丰度明显升高,NAFL+T2DM组表现为厚壁菌门、变形菌门和放线菌门丰度明显升高,拟杆菌门丰度明显降低。与NC组相比,CCl4组变形杆菌丰度明显升高,螺旋体菌门丰度降低。在属水平,NAFLD不同表型的优势菌群发生明显改变。与NC组相比,NAFL组梭菌属Ⅳ明显升高;NASH组的拟杆菌属、副杆状菌属、真杆菌属、葡萄球菌明显升高,而Barnesiella明显降低;NAFL+T2DM组寡养杆菌属、颤杆菌克、盐单胞菌属明显升高,而梭菌属XVⅢ、梭菌属Xl Vb明显降低。与NC组相比,CCl4组的瘤胃球菌属、Butyricicoccus、Intestinimonas、梭菌属Xl Va丰度特异性明显升高。此外,CCl4组螺杆菌、普雷沃菌属、脱硫弧菌科未知属、链球菌属丰度明显升高,而accharibacteriageneraincertaesedis、Odoribacter丰度明显降低。在盲肠内容物胆汁酸与肠道菌群关联性方面,门水平的放线菌丰度与Nor DCA、DCA成明显正相关,与6,7-diketo LCA、HCA成明显负相关。6,7-diketo LCA与拟杆菌属成明显正相关,而与厚壁杆菌成明显负相关。变形菌门与石胆酸（lithocholic acid,LCA）、Nor CA、TUDCA成明显正相关,Candidatus Saccharibacteria与LCA成明显负相关。属水平,拟杆菌属与TωMCA、β鼠胆酸（β-muricholic acid,βMCA）成明显负相关,副杆状菌属与α-鼠胆酸（α-muricholic acid,αMCA）、βUDCA、βMCA、牛磺β-鼠胆酸（tauroβ-muricholic acid,TβMCA）和TωMCA成明显负相关,普雷沃菌属与GCA成明显负相关。阿克曼菌与Nor CA和Nor DCA成明显正相关。瘤胃球菌与Nor DCA、TDCA、TCA、DCA、βMCA成明显负相关,而Escherichia/Shigella与αMCA、βMCA成明显正相关。真杆菌属与TωMCA、αMCA、βMCA、ωMCA成明显负相关。结论NAFLD疾病不同表型与不同部位（血清、肝脏和盲肠内容物）胆汁酸改变以及肠道微生态失调相关,肠道菌群可能与胆汁酸协同,促进NAFLD疾病发展。