论文部分内容阅读
谷胱甘肽过氧化物酶(Glutatheione Peroxidase,GSH-Px)最早是在动物体中发现的一种含硒酶,近年来在许多植物中也发现了该酶的存在,并发现适当浓度的外源硒能提高GSH-Px的活性.该研究以麦苗为研究对象,亚硒酸钠为外源硒,研究适当浓度的亚硒酸钠对麦苗GSH-Px活性的影响,并利用专一性转录和翻译抑制剂来探讨亚硒酸钠的诱导作用.从而更深入地理解外源硒诱导生物体内GSH-Px合成的机理,丰富植物代谢调控理论.结果显示:用1.0mg/L的亚硒酸钠根施小麦,可提高麦苗GSH-Px的活性,而高浓度的亚硒酸钠会对GSH-Px的活性产生抑制作用.适当浓度的转录和翻译抑制剂(AMD和CHI)可以抑制Na<,2>SeO<,3>所诱导的GSH-Px活性的增加,且其抑制效果相似.GSH-Px的PAGE图谱进一步证明外源硒的确诱导了GSH-Px的表达,且两种抑制剂均有明显的抑制效果.通过对核酸含量的测定,也表明适当浓度的亚硒酸钠的确能提高RNA和DNA的含量,促进基因表达.硒作为GSH-Px的重要组成成分,是合成GSH-Px所必不可少的,因此添加外源硒能够补充该酶的组分,提高GSH-Px的活性,并促进基因表达.我们认为外源硒之所以能诱导GSH-Px的生物合成,还存在两个方面的原因:其一,GSH-Px的诱导合成可能存在其他途径,在外源硒的参与下由其他物质合成GSH-Px;其二,硒可能直接或间接地导致了某些基因的表达,诱导了GSH-Px的生物合成.1.0mg/L的Na<,2>SeO<,3>不仅能提高麦苗GSH-Px的活性而且能提高谷胱甘肽转硫酶(GST)的活性,并增加谷胱甘肽(GSH)含量.GST活性与GSH-Px活性不一样,并不随着培养时间的增加而增加,而是下降.这就暗示GSH-Px可能与GST之间存在某种动态平衡关系和协同作用.不同浓度的亚硒酸钠处理,对麦苗清除羟自由基能力的影响和麦苗清除超氧阴离子自由基能力的影响趋势基本相似.即当亚硒酸钠浓度较低时,随着亚硒酸钠浓度的增加,麦苗清除两种活性氧的活力也逐渐增加;随着亚硒酸钠浓度的增大,麦苗清除两种活性氧的活力又逐渐降低.表明低水平的硒能提高麦苗对两种活性氧的清除能力,高水平的硒降低了麦苗对两种活性氧的清除能力.低水平的硒之所以能提高清除ROS的能力,我们认为有两个方面的原因:一方面,硒作为植物体内重要的抗氧化酶--谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的核心组分之一,在低水平时,能提高的GSH-Px的活性,通过GSH-Px的作用降低了ROS的含量;另一方面,由于硒可能引起ROS的产生,再通过ROS的信号传导功能,诱导了清除ROS的基因(如GSH-Px、SOD、CAT)的表达.