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背景与目的急性髓系白血病(AML)是一类高度异质性的血液系统恶性疾病,以分化阻滞和非成熟的白血病细胞在骨髓中过度增殖且凋亡受抑为特征,临床表现为贫血、出血、感染和浸润等症状。目前,AML的完全缓解率可达60%~80%,但仍有20%~30%的青壮年和40%~50%的老年AML诱导治疗失败,且50%~70%获得完全缓解的患者终将复发,再次缓解率仅为25%~40%,中位生存期不超过半年。解决耐药和复发是提高AML治疗疗效的关键。研究证实白血病干细胞(LSC)在AML的发生、发展、耐药及复发中起着重要作用。Jordan等对急性髓系白血病干细胞的研究表明,CD123是该种细胞特异性的表面抗原,而正常造血干细胞表面不表达CD123,把CD34+CD123+细胞亚群植入非肥胖糖尿病/重度联合免疫缺陷(NOD/SCID)小鼠模型体内可诱发小鼠发生AML。研究表明CD123的高表达与急性白血病患者治疗后的高残留病灶呈正相关,提示不良预后。随着二代测序技术的应用,新发现的遗传学异常不断完善着危险度分层并指导着临床决策,但由于染色体及分子生物学检查相对耗时较长,且约40%的AML患者缺乏克隆性异常,探究与预后相关的特异性白血病细胞表面抗原具有早期危险度分层和指导治疗的意义。本研究应用流式细胞术检测365例初治非APL的AML患者骨髓白血病细胞中的CD123表达水平,并收集这些患者的临床资料及定期随访,以探究CD123在AML中表达及其与临床特征、治疗预后的关系。材料与方法1.病历资料:郑州大学第一附属医院2015年1月至2016年12月期间诊断的365例初治非APL的AML(M0-M7)患者,其中男性患者216例,女性患者149例,中位年龄51岁(13~88岁)。所有病例常规进行血常规、血生化、骨髓穿刺等检查,AML的诊断和细胞遗传学/分子遗传学指标危险度分层标准参照《成人急性髓系白血病(非急性早幼粒细胞白血病)中国诊疗指南》(2017年版),疗效判定参照张之南《血液病诊断及治疗标准》。自诊断之日开始随访,死亡病例随访至死亡日期,存活病例随访至2018年1月1日。2.研究方法:以365例新诊断非APL的AML患者为研究对象,利用流式细胞仪检测其骨髓白血病细胞表面CD123的表达水平,并计算抗原表达比例,把抗原表达阳性率>20%定义为阳性表达。把365例非APL的AML患者由此分为CD123阳性组和CD123阴性组,并探索CD123的表达与疾病临床特征(年龄、性别、FAB分型、外周血细胞计数、乳酸脱氢酶、铁蛋白、骨髓原始细胞比例、细胞遗传学、分子生物学)和治疗疗效(1疗程化疗后的完全缓解率、复发率、耐药率、诱导达CR的疗程数、总生存)的关系。3.统计分析:采用SPSS 22.0软件分析数据,对称分布资料用算术均数描述平均水平,用标准差(或方差)描述其变异程度,非对称分布资料用中位数描述其平均水平,四分位数间距描述其变异程度。两组连续资料间的比较采用t检验或Wilcoxon秩和检验。采用卡方检验/Fisher确切概率法描述两分类变量的相互关系。绘制Kaplan-Meier生存曲线,各组生存曲线比较采用Log-rank法或Breslow法。应用COX回归分析多个因素对预后的影响。P<0.05,则差异有统计学意义。结果1.365例初诊非APL的AML患者,CD123阳性表达率为38.90%(142/365)。CD123阳性患者的初诊白细胞计数23.3×10~9/L(0.5-247.5)(Z=3.119,P=0.002)、乳酸脱氢酶486.5 U/L(136-3620)(Z=2.657,P=0.008),骨髓原始细胞比例67.2%(19-96.4)(Z=3.810,P=0.000)均高于CD123阴性患者。CD123阳性组与CD123阴性组之间的预后分组分布差异无统计学意义(χ~2=0.107,P=0.991)。CD123阳性患者伴FLT3-ITD基因突变阳性的有21.82%(24/110),CD123阴性患者伴FLT3-ITD基因突变阳性的有13.45%(23/171),差异有统计学意义(χ~2=3.365,P=0.048)。2.经过1疗程的诱导化疗,CD123阳性组CR率48.35%(44/91),CD123阴性组CR率为73.91%(102/138),差异有统计学意义(χ~2=15.506,P=0.000)。146例达CR的AML患者随访3年,共有48人复发,总复发率为32.87%(48/114),其中CD123阳性组复发率为47.73%(21/44),CD123阴性组复发率为26.47%(27/102),差异有统计学意义(χ~2=6.294,P=0.012)。CD123阳性组(平均秩次为88.77)与阴性组(平均秩次为75.54)对于达到CR所用疗程数差异有统计学意义(Z=-2.21,P=0.027)。229例于我院接受规律化疗及随诊的患者中,原发耐药AML患者有19例,CD123阳性组的原发耐药率为10.99%(10/91),CD123阴性组的原发耐药率为6.52%(9/138),差异无统计学意义(χ~2=1.438,P=0.230)。3.单因素分析发现,高龄(>60岁)及CD123表达阳性的患者CR率较低,多因素分析显示CD123表达阳性[OR=0.428(95%CI 0.210-0.875),P=0.02)]是影响AML患者1疗程CR的独立危险因素。4.Cox回归模型多因素分析发现,CD123表达阳性是影响患者OS的独立预后不良因素,OR是1.011(95%CI 1.000-1.022,P=0.048)。不同的预后分组里,预后低危和中危组中,CD123阳性组的中位OS时间较CD123阴性组短,但差异均无统计学意义(P>0.05)。结论CD123在初治非APL的AML患者中阳性表达率为38.9%,CD123表达阳性患者肿瘤负荷较高,表现为较高的初诊白细胞计数、乳酸脱氢酶水平及骨髓原始细胞比例。CD123的表达与FLT3-ITD基因突变具有相关性。CD123阳性患者具有更低的1疗程完全缓解率和更高的原发耐药率和复发率,它是影响AML患者1疗程CR和OS的独立危险因素,在预后低危组和中危组中,CD123阳性患者的中位OS时间和2年OS率更短。