木材褐腐菌可以分泌纤维素酶和半纤维素酶,在自然界纤维素循环中起到重要作用。桦剥管菌是一种典型的褐腐菌,但对桦剥管菌降解木材的研究较少。为了探讨桦剥管菌在降解木材纤维素过程中相关酶和蛋白表达量变化以及调控方式,对不同木屑(白桦、云杉)诱导培养的桦剥管菌的纤维素酶活性和胞内蛋白质表达进行比较研究,并对胞外分泌蛋白质表达进行初探。分别在23℃和28℃培养桦剥管菌,每24 h测量一次菌落直径。在23℃培养下平均生长速度为8.9 mm/d,28℃平均生长速度为13 mm/d。结果表明桦剥管菌更适合在28℃下培养。分别以白桦木屑、云杉木屑和麦麸为诱导物,以不加木屑的马铃薯液体培养基为对照,测定桦剥管菌在12d内的纤维素酶活变化。总体而言,内切纤维素酶最大,外切纤维素酶活次之,β-葡萄糖苷酶活性最小。内切纤维素酶活在前9d都表现出上升趋势,而外切纤维素酶培养初期酶活很高,随着时间增长酶活水平开始下降,在培养9d后酶活又开始增长。β-葡萄糖苷酶分泌时间较晚,在第12d才明显检测到酶活。通过蛋白质组双向电泳和Image Master分析,检测桦剥管菌在不同树种木屑诱导下的菌体胞内蛋白质组变化。与对照组(无诱导物)相比,处理组(木屑诱导)共检测到32个差异表达蛋白点。通过MALDI TOF/TOF成功鉴定17个蛋白点,其中上调表达蛋白有13个,下调表达蛋白点4个。这些蛋白具有多种分子功能,如转移酶、水解酶、蛋白结合、细胞信号转导等,并涉及到生物合成、分解代谢、刺激响应、含氮化合物代谢等过程。在菌体培养第15 d提取胞外分泌蛋白,通过蛋白双向电泳建立蛋白图谱,共选取24个蛋白点质谱分析,运用生物信息技术成功鉴定到16个蛋白。包括醇氧化酶、核糖体蛋白、1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶、转录调节因子、GMC氧化还原酶、短链脱氢酶、过氧化氢酶和染色体分割蛋白。这些蛋白多数参与到了过氧化氢的形成及电子传递过程,为桦剥管菌降解机理的进一步研究提供理论基础。