【摘 要】
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目的： 在单针灌注射频电极消融离体猪肝的基础上，探讨高温对体外培养肝癌细胞增殖能力的影响。 方法： 设置消融设备初始功率为200W、目标温度为105℃，采用不同消融有效
【出 处】
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北京协和医学院中国医学科学院 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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目的： 在单针灌注射频电极消融离体猪肝的基础上，探讨高温对体外培养肝癌细胞增殖能力的影响。 方法： 设置消融设备初始功率为200W、目标温度为105℃，采用不同消融有效时间，用单针灌注射频电极消融新鲜离体猪肝，观察超声声像图中汽化区与肉眼观实际消融灶的形态，比较声像图中气化灶与肉眼观实际消融灶的大小。再将消融有效时间固定设为9min，记录超声下测量距电极针不同距离的猪肝组织局部温度变化。 对人肝癌细胞系HepG2及人永久化肝细胞系LO2用不同温度(≥37℃)水浴加热10min后继续培养72h（37℃为对照组），观察各组细胞形态学变化。用CCK-8试剂处理各组细胞，分析不同温度对细胞活性和增殖能力的影响。用相同方法分析不同温度对47℃水浴加热10min后筛选出HepG2细胞和LO2细胞的活性和增殖能力的影响。 结果： 声像图中汽化区形态同实际消融灶相似。测量声像图汽化区横径与实际消融灶横径差异无统计学意义(P＞0.05)，声像图汽化区长径大于实际消融灶长径(P＜0.05)。当有效消融时间≥7min时，实际消融灶横径长短无明显变化。当有效消融时间≥3min时，距电极针0.8cm范围内组织局部温度可维持在50℃以上。 高温(≥50℃)水浴加热HepG2细胞和LO2细胞10min，可显著抑制细胞增殖(P＜0.05)，并对细胞产生不可逆损伤，使细胞立即或逐渐死亡。47℃水浴加热10min HepG2细胞的细胞活性无明显抑制(P＞0.05)。47℃水浴加热10min LO2细胞的细胞活性低于对照组(P＜0.001)，但继续培养增殖率可增高。高温(≥50℃)水浴加热10min可显著抑制47℃水浴加热10min后存活下来的HepG2和LO2的增殖，并对此两种细胞产生不可逆损伤。48℃水浴加热10min显著抑制47℃水浴加热10min后筛选出的存活HepG2的细胞活性(P＜0.001)。 结论： 1.超声是实时监测射频消融术的重要方法，对于使用单针灌注电极产生的消融灶横径大小有重要提示意义。 2.当单针灌注电极消融病灶有效时间≥12min时，二维超声声像图中汽化区距电极针垂直距离最大处组织细胞可被灭活。 3.高温(≥50℃)加热10min可使肝癌细胞灭活或遭受不可逆损伤。 4.高温(≥50℃)加热10min可使非致死性高温处理后残存肝癌细胞遭受不可逆损伤。 5.47℃持续加热10min对肝癌细胞活性无明显抑制。
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