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接骨木是集观赏、药用、食用等多种价值为一体的木本植物,全株含有多种复杂的生物活性物质。但其种子繁殖速度慢、出苗系数低,难以满足其产业化需要,因此迫切需要加强组织培养技术的研究。同时由于接骨木中含有生物碱、黄酮等物质,其提取物在抑菌及杀虫的应用方面有很大的潜力,很有希望成为新型植物源农药。但目前接骨木在农业生产中对植物病原菌和害虫的作用研究甚少。本试验以接骨木和西洋接骨木为试验材料,对其组织培养快繁体系的建立、其提取物对黄瓜灰霉病菌的抑制作用和活性物质含量的测定进行了研究,取得的主要成果如下: 1.建立了高效的接骨木离体快繁体系。 在10h光照时间下,MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.2mg/L+GA32.0mg/L是诱导接骨木无菌茎尖与茎段生成腋芽的最佳培养基,诱导率分别是96.67％与100%;MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.2mg/L+TDZ0.03mg/L+GA32.0mg/L是接骨木腋芽增殖的最佳培养基;生根的最佳培养基为MS+NAA0.4mg/L+IBA0.2mg/L,生根率达100%,平均主根数目为16条。MS+6-BA4.0mg/L+NAA0.2mg/L+GA33.0mg/L是诱导西洋接骨木茎尖与茎段生成腋芽的最佳培养基,诱导率分别是96.67%与100%;增殖的最佳培养基与接骨木相同;生根的最佳培养基为1/2MS+NAA0.3mg/L+IBA0.2mg/L。 2.研究了接骨木属植物提取物在植物病原真菌方面的作用。 以生长速率法测定了接骨木与西洋接骨木叶片5种不同极性溶剂(石油醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇)提取物对黄瓜灰霉病菌菌丝生长的抑制作用。在顺序提取方法中,接骨木乙醇提取物浓度为2000mg/L时,对供试病菌表现出最大的抑制效果,抑制率达29.9222%;西洋接骨木的乙酸乙酯提取物浓度为2000mg/L,对供试病菌的最大抑制率为37.6694%。 3.测定了接骨木属叶片中黄酮等生物活性物质的含量,分析了黄酮及盐酸小檗碱的含量与抑菌活性之间的关系。 对接骨木与西洋接骨木不同时期的鲜叶及5种不同极性溶剂的提取物采用蒽酮比色法、考马斯亮蓝法、芦丁比色法及盐酸小檗碱比色法分别测定了可溶性糖、可溶性蛋白、总黄酮及盐酸小檗碱的含量。结果表明,以上4种活性物质在接骨木与西洋接骨木不同时期的鲜叶中含量不同,其中接骨木在花前期可溶性蛋白和总黄酮的含量最高,分别为15.8700mg/g和12.7756mg/g,在盛花期可溶性糖和盐酸小檗碱的含量最高,分别为22.3222mg/g和8.0195mg/g;西洋接骨木在盛花期可溶性糖和总黄酮的含量最高,分别是21.3133mg/g和12.8082mg/g,在花后期可溶性蛋白和盐酸小檗碱的含量最高,分别为14.7401mg/g和7.9035mg/g。接骨木与西洋接骨木成熟叶片的5种不同极性溶剂提取物中以上4种活性物质含量也不同,在顺序提取方法中,接骨木乙醇提取物中4种活性物质的含量分别是256.7014mg/g、461.9506mg/g、78.8710mg/g、59.7799mg/g,当可溶性糖和可溶性蛋白总量与总黄酮和盐酸小檗碱总量的比值为5.1832及提取物浓度为2000mg/L时,对黄瓜灰霉病菌表现出最大抑制率;西洋接骨木的乙酸乙酯提取物中4种活性物质的含量分别是86.4200mg/g、815.1607mg/g、55.8610mg/g、86.4200mg/g,当可溶性糖和可溶性蛋白总量与总黄酮和盐酸小檗碱总量的比值为6.3366及提取物浓度达2000mg/L时,对黄瓜灰霉病菌表现出最大抑制率。因此两种树木可作为活性物质提取的材料来源。