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目的:了解临床分离的耐药大肠埃希菌株携带的β-内酰胺类、氨基糖苷类耐药基因以及可移动遗传元件的分布状况,同时对菌株之间进行亲缘性分析,从而为指导临床使用抗生素提供依据。方法:1.20株大肠埃希菌株收集自无锡市人民医院住院患者的临床标本,并进行菌株鉴定和药敏试验。2.应用PCR法扩增细菌的靶基因,包括21种β-内酰胺酶、7种氨基糖苷酶以及8种可移动遗传元件标记基因共36项,并以此为分子标记作聚类分析。结果:1.收集到的20株大肠埃希菌对自动药敏分析系统的9种抗生素均耐药,但对亚胺培南、美罗培南敏感,故判断为耐药大肠埃希菌。2.β-内酰胺类耐药基因检测结果:有2株大肠埃希菌未能检测出β-内酰胺酶基因,其余18株菌株检出TEM、CTX-M-1、CTX-M-9、LAT/CYM、OXA-1共5种β-内酰胺酶基因,阳性率分别为70%、30%、10%、5%、20%。有1株菌株同时检出最多4种β-内酰胺酶基因。3.氨基糖苷类耐药基因检测结果:20株大肠埃希菌菌株检出氨基糖苷修饰酶基因aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6’)-Ⅰb、ant(3’’)-Ⅰ、aad A5、aph3’-Ⅰ共6种氨基糖苷类修饰酶基因,阳性率分别为25%、35%、20%、15%、30%、15%。均未能检出16Sr RNA甲基化酶基因rmt B。20株大肠埃希菌全部至少检出1种氨基糖苷类耐药基因,其中有8株菌同时检出最多2种氨基糖苷类耐药基因;4.可移动遗传元件标记基因检测结果:20株大肠埃希菌菌株中,接合性质粒遗传标记基因tra A和tra C检出率均为80%;转座子遗传标记基因tnp513检出率为75%,均未能检出tnp U;插入序列IS26检出率为95%,IS903检出率为55%,ISEcp1检出率为40%;整合子遗传标记基因intⅠ1的检出率为100%。5.样本聚类分析结果:20株样本分为A、B两大簇群,在A簇群中,第12、13号菌株为同一克隆。结论:1.20株大肠埃希菌均携带均同时携带一种或多种β-内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶基因,这与其对上述药物的耐药现象密切相关;2.20株大肠埃希菌均同时携带多种可移动遗传元件,介导加速了该细菌临床耐药及播散现象;3.样本聚类分析结果表明存在克隆传播的医院感染。