太子参种质资源评价及种子质量标准研究

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太子参为石竹科植物孩儿参Pseudostellaria heterophylla (Miq.)Pax ex Pax et Hoffm的干燥块根,具有益气健脾、生津之功效。目前贵州施秉地区已成为全国太子参栽培的主产区之一。优良种源是品种选育的重要内容,为了推动贵州栽培太子参种植的规范化,促进品种选育和种子种苗质量标准的实施工作,本论文基于农艺性状、化学成分分析和遗传学特性分析等研究手段,对贵州所种植太子参的主要种质资源进行了系统评价,并研究建立了太子参种子检验规程和种子质量分级标准。主要研究结果如下:1、对贵州所种植太子参的3种栽培类型120个单株样本的13个农艺性状进行测量并通过单因素方差分析、多重比较、多元回归、通径分析,表明3种栽培类型间各农艺性状均存在不同程度的差异;32个农艺性状之间存在显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)的相关性;块根数、块根粗、一级分枝数、闭锁花数、叶长、叶宽和地上生物量是影响地下生物量的主要因子;块根数、地上生物量对地下生物量直接作用较大,同时全株长、叶长、叶宽、闭锁花数等性状对地下生物量亦有直接或间接作用。研究分析认为,地上生物量可作为太子参高产选育最佳的农艺性状的间接指标,茎的一级分枝数、叶宽和闭锁花数可作为太子参高产选育较好的农艺性状辅助指标。2、通过对筛选出的80份太子参优异的种质资源23个农艺性状进行主成分分析与聚类分析,表明栽培太子参的表型差异较大,遗传表现丰富,多样性指数最高的是鲜根上径,最低的是主茎节数。通过聚类分析可将80份种质划分为4大类群,第Ⅰ类群可作为有增产潜力的亲本材料,第Ⅱ类群可作为高产选育目标的最优亲本材料,第Ⅲ类群可作为药材短胖型(太子参药材一等商品)育种目标的亲本材料,第Ⅳ类群为选育中较差的亲本材料。23个数量性状的主成分分析表明,前6个主成分累计贡献率达76.48%,可以概括23个农艺性状绝大部分的信息量,各主成分能分别反映太子参各性状信息。3、通过动态检测贵州所种植的3个栽培类型、2种繁殖材料的生物量和太子参环肽B含量变化,结果显示,随着生长期的变化,无性繁殖的栽培样本(XZ-1、 XZ-2、XZ-3)分别在7月初、6月下旬和7月上旬达到最高地下生物量(9.86g/株、3.61g/株和10.40g/株),而太子参环肽B的含量仅XZ-1在7月上旬达到药典规定(0.0213%)。在采收期,XZ-1和XZ-3的生物量显著高于XZ-2,而XZ-1和XZ-2的太子参环肽B含量显著高于XZ-3,同一栽培类型有性繁殖XZ-1Y的生物量低于无性繁殖XZ-1,太子参环肽B含量则显著高于XZ-1。研究认为,太子参栽培类型XZ-1的品质较好,属于值得推广的栽培类型,也适宜作为优良品种的选育对象,其最佳采收期应为植株倒苗后10天左右。4、通过对贵州太子参12个引种种源进行遗传多样性与药材品质分析,其中ISSR分子标记的研究显示,栽培太子参的遗传多样性极为丰富,其中JRYS(江苏句容马山野生)多态性百分比最高(91.46%),SBYS(施秉逸生种)最低(59.76%);遗传聚类可以划分为3个大种源组。而以太子参环肽B为指标的HPLC分析显示,JSYS1(江苏句容赤山湖野生)最高(0.0494%),无花太子参(施秉无花和柘荣无花)环肽B含量最低(0.0001%和0.0061%)。综合研究结果,本论文认为,太子参种源间的遗传变异与地理分布存在很大相关性,地理位置接近的种源遗传距离较小,与形态特征也存在一定的相关性。其中施秉常用种源内差异小,药材品质较好,是贵州栽培及育种中减少纯化较为优良的种质资源:江苏句容野生种源作为可作为育种、推广种植的优良种质。5、通过阐明太子参种子的休眠机制主要是生理性休眠,生产实践中以-2~3℃砂藏层积45~50d打破休眠为宜,500~600mg/L的赤霉素浸种6h结合-2~3℃砂藏层积可明显缩短太子参种子打破休眠的时间;种子萌发的最适条件为10℃下砂上培养;在以上研究结果基础上,继续对施秉种源的种子进行取样、净度、千粒重、含水量、生活力、发芽率等指标的研究,制定了包括取样、净度分析、发芽实验、真实性鉴定、水分测定、重量测定、活力测定、生活力测定等太子参种子的检验规程;并完成13份不同种源的种子检验,以发芽率作为主要指标,净度、千粒重和含水量作为参考指标,初步制定了太子参种子质量分级标准。从源头上保证了太子参药材种子质量,并对中药种子质量标准的制定具有示范意义。综上所述,通过本论文的研究工作,我们在种质筛选方面,成功以农艺性状评估太子参种质资源,为太子参品种选育在农艺性状方面提供明确指标,同时以化学成分和遗传学性状分析相结合的方法对各种质进行评价,为各种质在栽培、选育和保护等方面提供了明确思路;在太子参药材采收期方面,阐明了太子参生物量和化学成分随植株生长的变化规律,确定了最佳采收期的判断依据;在太子参种子检验和质量分级方面,首次揭示太子参种子的休眠机制,优选出解除休眠最佳条件及发芽的最佳条件,同时通过对太子参种子质量标准的研究,制定了太子参种子检验规程及其种子质量分级标准。
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