论文部分内容阅读
背景:骨性关节炎(OA)是常见的关节退行性疾病,目前尚无治愈OA的方法,发展疗效显著、可靠安全并能促进软骨修复的药物一直是OA治疗的热点和难点。红景天(Rhodiola)为景天科红景天属多年生草本植物,其具有广谱的药理学特性,主要活性成分红景天苷(Sal)的抗损伤和抗炎作用日益受到关注。我们以及他人的研究显示,红景天苷(Sal)对不同原因诱导的细胞损伤具有保护作用。目的:旨在探讨红景天苷(Sal)对碘乙酸钠(MIA)诱导大鼠骨性关节炎(OA)的保护作用及其保护作用的细胞机制。方法:雄性SD大鼠分为生理盐水对照组(NS组)、碘乙酸钠造模组(MIA组)和碘乙酸钠+红景天苷干预组(MIA+Sal组),膝关节腔注射MIA造模,造模后3天,膝关节腔注射Sal干预,每隔3天一次。观察大鼠一般情况、测量体重、评估步态、拍照关节、测量关节直径、测量后肢体重承受分布,造模后28天,麻醉处死大鼠,取血和双侧关节。酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中白细胞介素-Iβ(IL-13)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,解剖显微镜下观察关节大体变化以及损伤评分,组织切片苏木精-伊红(H&E)染色和番红O-固绿染色观察组织病理学变化以及损伤评分。分离培养大鼠关节软骨细胞,活细胞观察和甲苯胺蓝染色鉴定,细胞分为生理盐水对照组(NS组),IL-1β造模组(IL-1β组)和 IL-1 β+Sal 干预组(IL-1β+Sal 组),CCK-8 检测细胞活力,酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养上清中前列腺素E2(PGE2)含量,硝酸还原酶法测定培养上清中一氧化氮(NO)含量,蛋白免疫印迹(Western Blot)检测细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白、环氧化酶2(COX2)蛋白、基质金属蛋白酶13(MMP13)蛋白、含血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶5(ADAMTS5)蛋白以及磷酸化核因子-κB(pNF-KB)蛋白和总NF-κB蛋白表达。结果:MIA造模后,大鼠出现关节肿胀、疼痛行为和行动障碍等OA典型的症状和体征,关节大体和组织病理学显示关节软骨的损伤。Sal干预后,能明显缓解MIA诱导的OA大鼠一般情况,减轻OA大鼠关节肿胀,缓解OA大鼠疼痛行为,抑制OA大鼠血清促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α释放,明显改善OA大鼠关节软骨的破坏程度,促进OA大鼠关节软骨的组织修复。在细胞水平,Sal预处理能抑制IL-lβ刺激分离培养的大鼠软骨细胞分泌NO和PGE2,降低IL-1β刺激软骨细胞iNOS和COX2蛋白的表达水平,降低IL-1β刺激软骨细胞MMP13和ADAMTS5蛋白的表达水平,抑制NF-κB信号通路的活化。结论:红景天苷对大鼠实验性骨关节炎有治疗作用,其机制与抗炎及软骨细胞保护作用有关,可能成为骨关节炎的有效治疗药物。