背景组织工程技术为难以修复的软骨疾病提供了新的治疗思路，但至今获得足量的种子细胞仍是软骨组织工程的难题。目的建立乳兔软骨细胞分离、培养的方法并观察软骨细胞生物学特性。方法采用两步酶消化法，将乳兔关节软骨进行分离、培养。采用HE染色和甲苯胺蓝染色对软骨细胞进行鉴定，用MTT法绘制生长曲线、并在倒置显微镜观察各代软骨细胞形态、通过免疫组化染色、逆转录-聚合酶反应（RT-PCR）法观察其生物学特性。结果与结论通过两步酶消化法，成功分离出乳兔关节软骨细胞，进行培养24h后细胞贴壁呈短梭形。培养2W左右软骨细胞聚集似“铺路石”样。MTT法显示细胞生长曲线近似“S”形。甲苯胺蓝呈阳性结果，并随代数增加阳性结果呈减弱趋势。通过免疫组化染色和逆转录-聚合酶反应（RT-PCR）显示随代数增加软骨细胞Ⅰ型胶原表达增强，Ⅱ型胶原表达减弱。本研究采用两步酶消化法，成功获取大量活性好、纯度高的软骨细胞，3代以内软骨细胞生长良好，并保持其生物学特性，适于软骨组织工程的应用。3代以后开始出现去分化现象。目的观察JEZTC对体外分离培养的兔软骨细胞生物学特性的影响。方法在体外培养的兔关节软骨细胞，在不同组间加入不同浓度的JEZTC（0，2.344，4.688，9.375ug/ml）处理。分别于2、4、6天用MTT检测在不同浓度的JEZTC作用下，对兔软骨细胞增殖的影响;并通过二甲基亚基蓝（DMMB）检测、番红O染色、Hoechst33258染色、钙黄绿素/PI染色、伊红（HE）染色、鬼笔环肽染色及观察不同浓度下软骨细胞特性的变化。采用RT-PCR法检测糖胺聚糖、Ⅰ型胶原基因、Ⅱ型胶原基因、Ⅹ型胶原基因及Sox9基因的表达，进一步观察细胞生物学特性的变化。结果通过MTT检测发现JEZTC在浓度为4.688ug/ml时，表现出对软骨细胞良好的促增殖能力。JEZTC组在HE染色、番红O-快绿染色和鬼笔环肽染色与对照组内的软骨细胞形态并没有改变。通过Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫组化染色发现，软骨细胞在培养第2天、第4天、第6天中II型胶原蛋白表达量较对照组高，而培养的软骨细胞其I型胶原表达量较对照组低。在JEZTC组与对照组基因表达中，发现SOX9基因、蛋白聚糖基因、Ⅱ型胶原基因的有显著上调（p<0.05），但JEZ-TC组内Ⅰ型胶原基因的表达水平均小于对照组（p<0.05）。软骨细胞在浓度为4.688ug/ml下培养的第4天和第6天，其SOX9基因、蛋白聚糖基因、II型胶原基因的表达能力最强。结论JEZTC不仅能促进软骨细胞外基质的生成而且维持着软骨细胞生物学特性的功能，这将有望成为延缓骨性关节炎进一步退变新型治疗药。目的观察关节腔内注射JEZTC合成药对兔骨关节炎的治疗作用。方法将18只雄性新西兰大白兔与术后2周，随机分为三组，每组6只。JEZTC组行双膝关节交叉韧带离断术，术后8周在关节腔内注射JEZTC溶液0.5ml，每周一次。关节炎组在行交叉韧带离断术后,不给以任何治疗。假手术组在显露关节腔内交叉韧带后，随即缝合切口。术后12周、16周处死动物，取膝关节标本，行大体形态学学Pelletier评分，切片番红染色并行Mankin软骨评分。通过PCR检测MMP-1、MMP-3、MMP-13、TIMP-1相关基因的表达。结果12W大体观察JEZTC组股骨髁评分（2.17±0.41）低于骨关节炎组（2.83±0.75），差异无统计学意义（P=0.101）。16W时JEZTC组软骨评分（2.50±0.55）较关节炎组（3.33±0.52）低，差异具有统计学意义（P=0.046）。组织学观察12W JEZTC组软骨结构、软骨细胞、番红染色、潮线与骨关节组比较有统计学意义（P=0.003；P=0.010;P=0.004;P=0.018），16W时两组在软骨结构、软骨细胞、潮线上的比较有统计学意义（P=0.001;P=0.018;P=0.003）。PCR检测中发现JEZTC组在12W和16W的MMP-1，MMP-3、MMP-13的基因表达量较关节炎组低，12W时JEZTC组的MMP-1、MMP-3、MMP-13的基因表达与关节炎组比较有统计学意义（P=0.000；P=0.001;P=0.017），16W时C组的MMP-1、MMP-3、MMP-13、TIMP-1的基因表达与关节炎组比较有统计学意义（P=0.000;P=0.000;P=0.003;P=0.045）。结论JEZTC化合药对关节软骨有保护作用，并延缓了骨关节炎的进展。