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目的本研究预采用实时定量聚合酶链式反应(PCR)结合荧光探针技术对60例有家庭聚集性的HBV感染者进行HBV基因分型,并探讨基因型分布及其与病毒载量及肝组织病理的关系。材料与方法一、研究对象本实验60例有家庭聚集性的HBV感染者血清均取自2006年12月到2008年12月在中国医科大学附属盛京医院感染科住院的沈阳地区患者,所有血清均为HBsAg和HBV DNA阳性(HBV DNA水平≥10~3copies/ml为阳性)。其中临床诊断慢性无症状HBV携带者(ASC)16例,慢性乙型肝炎(CHB)患者32例,代偿期肝硬化(LC)患者12例,年龄10～55岁,平均年龄32岁,均进行HBV基因型检测,HBV DNA定量检测,肝组织病理检测。研究对象入选标准:1)家庭聚集性慢性HBV感染者诊断标准:HBV感染者凡符合其母亲或(和)父亲HBV标志物阳性及同胞中大于或等于1人为HBV标志物阳性者,均可为家庭聚集性慢性HBV感染。2)临床诊断:依据2000年拟定的病毒性肝炎防治方案。二、HBV基因分型采用PCR技术结合荧光探针技术,对乙型肝炎病毒基因进行荧光PCR分型检测,试剂盒由杭州博康生物科技有限公司生产,该试剂盒只能检测乙肝病毒基因B、C基因型,仪器使用ABI7500多色荧光PCR仪及相应软件。三、HBV DNA定量检测荧光定量PCR检测,试剂盒由深圳匹基生物制品有限公司生产,检测灵敏度为10~3copies/ml,仪器使用Lanegene FQ-PCR荧光定量扩增仪。四、肝组织病理检测60例患者肝组织取材均在超声引导下进行,取肝组织2cm,常规4%甲醛固定,石蜡包埋,标本切片为4μm,均做HE、MASSON及网状纤维特殊染色,提出炎症分级(G)/纤维化分期(S)诊断。其G/S诊断参照2000年病毒性肝炎防治方案。五、统计学分析在医学统计软件spss15.0上进行X~2检验,以P＜0.05确定差异有无统计学意义。结果1、HBV基因型分布60例患者中,B型14例,占23.3%,C型40例,占66.7%,无法分型6例,占10%。其中,在16例临床诊断的ASC中,B型3例,占18.75%,C型12例,占75%;在32例CHB患者中,B型11例,占34.375%,C型17例,占53.125%;在12例LC患者中,C型11例,占91.7%。2、HBV基因型与病毒载量的关系将HBV DNA载量分为两组,其中＜10~6copies/ml为低载量组,≥10~6copies/ml为高载量组。在临床诊断的16例ASC中,HBV DNA均为高载量组;在32例CHB患者中,HBV DNA有9例为低载量组,23例为高载量组;在12例LC患者中,6例为低载量组,6例为高载量组。B、C基因型均以高载量为主,经X~2检验后,P值＞0.05,两型之间病毒载量并无明显差异。3、HBV基因型与肝组织病理的关系B型肝组织病理损害较轻,≤G1者13例(92.9%),≤S1者12例(85.7%);C型肝组织病理损害较重,≥G2者21例(52.5%),≥S2者18例(45%)。在12例LC患者中,几乎均为C型(91.7%),提示C型与严重肝病有关。在11例B型CHB患者中,≤G1者10例(90.9%),≤S1者9例(81.8%);在17例C型CHB患者中,≤G1者7例(41.2%),≤S1者8例(47.1%);≥G2者10例(58.8%),≥S2者9例(52.9%);经X~2检验后,X~2=76.6,P＜0.05,提示C型患者的肝细胞炎性损伤程度及肝组织纤维化程度均高于B型患者,即C型肝组织损伤较重。16例ASC中,肝组织怖砦廾飨员浠?例,有不同程度的肝损害的13例(81%)。结论1、沈阳地区家庭聚集性HBV感染者HBV基因型以C基因型为主。2、B基因型和C基因型在病毒载量方面,两者之间并无明显差异。3、C基因型慢性HBV感染者肝组织损伤重。