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目的:观察通络益肾汤对高糖培养下大鼠肾小球系膜细胞凋亡过程中内质网应激蛋白CHOP、JNK基因mRNA表达的影响，探讨其防治糖尿病肾病的可能机制。进一步明确在内质网应激中不同时间点高浓度葡萄糖介导的肾细胞凋亡具体的途径，为临床靶向治疗提供实验依据;从内质网应激角度探索通络益肾方调控细胞凋亡、发挥肾保护作用的CHOP、JNK通路的分子机制;最终为临床通络益肾法及方治疗DN的广泛应用提供理论依据。 方法:研究对象为体外培养的大鼠肾小球系膜细胞，培养的肾小球系膜细胞分为正常组、高糖培养组(病理组，糖浓度为30mmol/L)、高糖+通络益肾汤大、中、小剂量组及高糖+洛丁新、糖适平组，用大鼠含药血清给药处理，分别给予相应处理12h、24h、48h、72h后，采用四甲偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞凋亡，PT-PCR法检测GRP78、CHOP、JNK蛋白mRNA的表达水平。 结果:1.MTT结果:与正常组比较，模型组高糖刺激对肾小球系膜细胞在12h、24h、48h和72 h均有明显增殖效应，差异显著(p＜0.01)。与模型组比较，中药组各组0D值在12h、24h、48和72 h均随着给药浓度的增加而依次降低，表明通络益肾汤可成剂量依懒性抑制高糖诱导肾小球系膜细胞增殖，其中中药大剂量0D值最小，抑制效果最明显;在12h、24h、48h和72 h中药大、中、小组与西药组比较比较，西药组0D值略小，表明抑制作用更好（p＜0.05或p＜0.01）;在12h、24h、48h和72h与中药小剂量组比较，中药大、中剂量组0D值低（p＜0.05或p＜0.01）;在12h、24h、48h和72 h，与中药中剂量组相比，中药大剂量组0D值低(p＜0.05或p＜0.01);2.流式细胞仪检测细胞凋亡结果:相对正常组大鼠肾小球系膜细胞，模型组凋亡率在24h、48h和72 h时明显上升（p＜0.05或p＜0.01），表明高糖在24 h以后有明显促进细胞凋亡的作用;相对模型组，各给药组细胞凋亡率均小于模型组（p＜0.05或p＜0.01）;各中药组24h、48h和72 h随着中药剂量的增加凋亡率均依次降低（p＜0.05或p＜0.01）;与西药组相比中药小剂量组在48h凋亡率高(p＜0.05)，但在72 h时凋亡率低于西药组(p＜0.05);与西药组相比中药中剂量组在48h、72h凋亡率低于西药组(p＜0.05);与西药组相比中药中剂量组在24h、48h、72h凋亡率低于西药组(p＜0.05)表明与西药组相比，中药组在后期更能明显降低细胞凋亡率;3.各组细胞GRP78mRNA表达情况:与正常组比较，模型组系膜细胞GRP78mRNA相对表达量在24 h、48h、72 h时明显增加(p＜0.01或p＜0.05)。相对于模型组，各给药组GRP78相对表达量在12h、24 h时无差异(p＞0.05)，48h、72 h时明显减低(p＜0.01)。各中药组在48h、72 h时随着中药剂量的增加，GRP78mRNA的相对表达量依次降低(p＜0.05或p＜0.01);在48h、72h与西药组比较，各中药组GRP78mRNA相对表达量较低(p＜0.05或p＜0.01);4.各组细胞JNKmRNA表达情况:与正常组比较，模型组系膜细胞JNKmRNA相对表达量在12h、24 h无差异(p＞0.05)，48h、72 h时明显增加(p＜0.01)。与模型组比较，各给药组JNKmRNA相对表达量在12h、24 h时无差异(p＞0.05)，48h、72 h时明显减低(p＜0.05或p＜0.01)。各中药组在48h、72 h时随着中药剂量的增加JNKmRNA的相对表达量依次降低(p＜0.05或p＜0.0l)，其中中药大、中剂量组与模型组比较有显著性差异(p＜0.01);与西药组相比，中药大、中剂量组JNKmRNA相对表达量小(p＜0.05);5.各组细胞CHOPmRNA表达情况:与正常组比较，模型组系膜细胞CHOPmRNA相对表达量在12h、24 h无差异(p＞0.05)，48h、72 h时明显增加(p＜0.01)。与模型组比较，各给药组CHOPmRNA相对表达量在12h、24 h时无差异(p＞0.05)，48h、72 h时明显减低(p＜0.01或p＞0.05)。各中药组在48h、72 h时随着中药剂量的增加CHOPmRNA的相对表达量依次降低(p＜0.01或p＞0.05);在48h、72h与西药组比较，中药大、中剂量组CHOPmRNA相对表达量低(p＜0.01或p＞0.05)。 结论:1.本实验验证了高糖环境下随着作用时间的延长肾小球系膜细胞增殖逐渐减弱和凋亡显著增加，内质网应激发生在48h时，并呈持续性。西药组抑制细胞增殖的效果好于中药组;2.通过对ERS相关凋亡分子的检测，证实了CHOP、JNK途径参与到高糖诱导肾小球系膜细胞凋亡内质网应激过程中;3.通络益肾汤呈剂量依赖性，通过下调CHOP、JNK基因表达而抑制大鼠肾小球系膜细胞凋亡，并且抑制作用强于西药组。