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目的：
观察静脉注射红花黄色素对急性肺损伤后大鼠肺组织病理及含水量变化、血氧分压改变的影响,通过检测炎症因子mRNA水平,NF-κB及p38MAPK蛋白变化情况,探讨红花黄色素缓解急性肺损伤的作用及其机制,为红花黄色素缓解肺部炎症反应的应用提供支持。
材料与方法
选取清洁级成年健康雄性wistar大鼠,随机分成正常对照组、油酸组、油酸+山莨宕碱组、油酸+低剂量红花黄色素组、油酸+中剂量红花黄色素组、油酸+高剂量红花黄色素组,n=12。每组在静脉注射油酸前给予药物干预,静脉注射油酸4h后采集腹主动脉血,测定动脉血氧分压之后处死大鼠采集肺组织标本。测定大鼠左肺湿重和干重,计算大鼠左肺含水系数；邻联茴香胺比色法测定大鼠肺组织内MPO水平；RT-PCR法测定大鼠肺组织TNF-α、IL-β、IL-6、ICAM-1、VCAM-1的mRNA水平；免疫组织化学染色观察大鼠肺组织p65蛋白分布,计算NF-κBp65阳性细胞数；western blot法检测大鼠肺组织p38MAPK蛋白磷酸化水平。传代培养内皮细胞株Eahy926,随机分成正常对照、PAF损伤组、PAF+银杏内酯B对照组、PAF+低剂量羟基红花黄色素A组、PAF+中剂量羟基红花黄色素A组、PAF+高剂量羟基红花黄色素A组。药物作用4h后,RT-PCR法检测各组IL-β、IL-6、ICAM-1、VCAM-1的mRNA水平。
结果：
油酸+红花黄色素低、中、高剂量三组PaO2值均高于油酸组,左肺含水系数和MPO活性以及TNF-α、IL-1β、IL-6、ICAM-1、VCAM-1的mRNA水平,NF-κBp65阳性细胞数和p38MAPK蛋白磷酸化水平均低于油酸组。且上述观察值均随着红花黄色素的剂量增高其改善程度愈明显,其中油酸+高剂量红花黄色素组的观察值已明显优于油酸+山莨宕碱组,接近于正常组水平。而在细胞实验中,三个PAF+羟基红花黄色素A组的IL-1β、IL-6、ICAM-1、VCAM-1mRNA水平均显著低于PAF损伤组,和PAF+银杏内酯B组相近。
结论：
红花黄色素可缓解急性肺损伤所致肺水肿,提高动脉血氧分压,减少肺部炎性细胞浸润,下调TNF-α、IL-1β等炎症因子的表达,其作用机制之一可能和抑制p38MAPK磷酸化及NF-κB活化有关。