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目的探讨EZH2促进膀胱癌生长的机制。方法以siRNA的方式敲降EZH2；高表达或抑制miRNA-143处理膀胱癌细胞T24和5637,通过细胞生存实验观察膀胱癌细胞的生长情况；克隆形成实验观察肿瘤细胞的增殖能力。以实时定量PCR检测经相应处理的膀胱癌细胞mRNA水平的变化。为了验证miRNA-143是EZH2的靶基因,以染色质免疫共沉淀技术(CHIP)检测EZH2对miR-143的结合情况。提取经敲降EZH2；高表达或抑制miRNA-143处理的T24和5637膀胱癌细胞总蛋白质,应用蛋白质免疫印迹检测法(Western blot)观察细胞增殖蛋白和肿瘤恶性程度蛋白的表达情况。结果体外实验中,以siRNA敲降EZH2,细胞生存实验显示与siCTRL组相比,敲降EZH2后膀胱癌细胞T24和5637的生长受到抑制。克隆形成实验结果显示与siCTRL组相比,敲降EZH2七天后,膀胱癌细胞T24和5637中敲降EZH2细胞克隆团数会下降。Western blot法显示在T24和5637膀胱癌细胞中,与siCTRL组相比,敲降EZH2的效果满意；在敲降EZH2后代表肿瘤恶性程度的蛋白CD44、Notch-1、Sox-2. EZH2靶蛋白H3K27me3的表达量下降,细胞增殖蛋白CyclinD1的表达量亦下降。体外实验中,以siRNA敲降EZH2, Q-PCR显示随着EZH2的敲降,在膀胱癌细胞T24和5637中miRNA-143和miRNA-145的表达量上升。接着我们用CHIP实验来检测EZH2如何作用于miRNA-143,结果显示EZH2通过与miRNA-143启动子区域结合来干扰miRNA-143的表达。提示miRNA-143是EZH2的直接靶基因。体外实验中,以瞬时转染的方式高表达miRNA-143 (mimic miR-143),细胞生存实验显示与对照组相比,高表达miRNA-143后膀胱癌细胞T24和5637的生长受到抑制,克隆形成实验结果显示,在膀胱癌细胞124和5637中高表达miRNA-143细胞克隆团数会逐渐下降。Western blot法显示在T24和5637膀胱癌细胞中,与对照组相比,在高表达miRNA-143后代表肿瘤恶性程度的蛋白CD44、Sox-2的表达量下降,细胞增殖蛋白CyclinD1的表达量亦下降,而EZH2蛋白表达量并未受影响。体外实验中,瞬时转染siRNA敲降EZH2,或瞬时转染抑制miRNA-143,细胞生存实验显示与对照组相比,单独敲降EZH2,会抑制膀胱癌细胞T24和5637的生长；同时敲降EZH2和抑制miRNA-143后膀胱癌细胞T24和5637的生长受到刺激,克隆形成实验结果显示T24细胞siCTRL+CTRL inhibitor组、siEZH2+CTRL inhibitor组和siEZH2+miR-143inhibitor组克隆团数分别为：214.33±3.28、59.33±0.89、134.03±6.11个； 5637细胞siCTRL+CTRL inhibitor组、siEZH2+CTRL inhibitor组和siEZH2+miR-143inhibitor组克隆团数分别为：148.05±2.03、72.00±13.00、105.7±2.40个,提示在膀胱癌细胞T24和5637中抑制miRNA-143可以逆转敲降EZH2引起的细胞克隆团数下降。Western blot法显示在T24和5637膀胱癌细胞中,与siEZH2相比,在抑制miRNA-143后代表肿瘤恶性程度的蛋白CD44、Sox-2的表达量上升,细胞增殖蛋白CyclinDl的表达量亦上升。提示EZH2引起的增殖可以通过改变其下游miRNA-143来逆转。结论EZH2可以通过直接抑制miRNA-143而促进膀胱肿瘤细胞的生长。