促红细胞生成素及其受体在卵巢癌细胞的表达和相关作用的研究

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目的:探讨促红细胞生成素受体在卵巢癌细胞上的表达及重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin ,rhEPO)对卵巢癌HO-8910细胞增殖的影响,为临床应用rhEPO治疗卵巢癌继发贫血提供一定的实验依据,为rhEPO能否替代输血安全应用于卵巢癌贫血的治疗提供新的理论依据。方法:卵巢癌HO-8910细胞在复苏后用含10%胎牛血清RMPI-1640培养基在37℃,5%CO2环境下常规培养。稳定传代2d后备用,取6瓶HO-8910细胞,加入含有浓度分别为50U/mL、100U/mL、200U/mL的rhEPO的培养基继续培养,作为实验组;同时以2瓶没有加rhEPO的卵巢癌HO-8910细胞为对照组。分别培养48h和72h后,用离心沉淀法收集各培养瓶中的细胞:①用RT-PCR法检测人卵巢癌细胞株HO8910 EPORmRNA的表达,β-肌动蛋白作为内对照,32个循环后以1%琼脂糖凝胶电泳,凝胶成像分析系统进行凝胶扫描及分析,以EPORmRNA扩增带与β-肌动蛋白扩增带的灰度比值作为EPORmRNA表达相对值。②用流式细胞仪检测r-HuEPO对卵巢癌细胞凋亡及增值影响。结果:显著差异(均为P<0.01)。实验组卵巢癌细胞EPOR表达水平与对照组血相比有所降低,各实验组间比较无统计学差异,实验组和对照组之间比较有统计学差异(P<0.01)。1、实验结果显示:经不同浓度的rhEPO处理组在48h、72h这两个时间点,与对照组相比时,P均<0.01,且经不同浓度的rhEPO处理组的EPORmRNA表达的相对值均较对照组有所减少,但不同浓度处理组之间EPORmRNA表达的相对值没有统计学差异。对于同一浓度的EPO处理组在不同时间点相比,P均﹥0.05.2、实验结果显示:经不同浓度的EPO处理组在48h、72h这两个时间点,与对照组相比时,P均<0.01,且经不同浓度的EPO处理组的S期细胞百分率较对照组有所减少,但不同浓度处理组之间S期细胞百分率没有统计学差异。对于同一浓度的EPO处理组在不同时间点相比,P均﹥0.05。结论:1. EPOR在卵巢癌细胞株HO 8910有表达,2.经过高浓度的rhEPO处理后,卵巢癌HO-8910细胞表面EPOR的表达减少,S期细胞百分率也有所降低,提示了高浓度的rhEPO可能抑制卵巢癌HO-8910细胞的生长、增殖。因此r-HuEPO可用于卵巢癌伴发的贫血的治疗。
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