土壤镉胁迫下菲降解菌的筛选及其特性研究

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本研究以耐镉(Cd)的菲降解细菌为研究目标,从东北地区长期遭受多环芳烃(PAHs)-重金属复合污染的土壤中,筛选得到三株能在高浓度Cd胁迫下降解菲的细菌。对这三株菌株进行了形态学和生理生化反应的研究。提取了16S rDNA,通过与同源菌株的比对,分别被鉴定为粪产碱杆菌J08(Alcaligenes faecalis strain J08)、短波单胞菌X08(Brevundimonas sp. Strain X08)和恶臭假单胞菌Q09(Pseudomonas putida strain Q09)。根据16S rDNA进化树的分析,发现这三株菌株分别分布在Proteobacteria门中的β亚门、α亚门和γ亚门。酵母提取物能有效促进Alcaligenes faecalis strain J08和Brevundimonas sp. Strain X08的生长和降解菲的能力。Alcaligenes faecalis strain J08和Brevundimonas sp. Strain X08菌株在没有Cd胁迫时,培养84h后对菲的降解率分别为97.7%和99.1%。而在Cd浓度为0.01 mM,0.1 mM时,两株菌株生长和菲降解能力与无Cd胁迫时相比差异不显著(p > 0.01)。在Cd浓度为0.5 mM时,Alcaligenes faecalis strain J08菌株的生长和菲降解能力与无Cd胁迫时相比差异不显著(p > 0.01)。Brevundimonas sp. Strain X08菌株生长受到一定抑制,延迟期增加,但是菲的比降解速率显著高于其他各组(p < 0.01)。Pseudomonas putida strain Q09菌株在无Cd胁迫时,在不含酵母提取的培养基中培养84h,对菲的降解率为93.5%的菲。在Cd浓度为0.01 mM,0.1 mM和0.2 mM胁迫时,该菌株的生长延迟期随着Cd浓度的增加而增加,菲降解的起始时间也随着Cd浓度的增加而延后。菲降解开始后,菲的降解速率在各处理中差异不显著(p > 0.01)。比较这三株菌株的镉耐受和菲降解性能后发现,他们的菲降解能力接近。其中,Alcaligenes faecalis strain J08具有最好的镉耐受性,高浓度镉能影响Brevundimonas sp. Strain X08和Pseudomonas putida strain Q09的生长与菲降解能力。Pseudomonas putida strain Q09在Cd胁迫下,能去除培养基中可溶性Cd,培养84h后,溶液中84.7%的可溶性Cd被转化为对菌株毒害较小的不溶性Cd。该菌株不仅表现出良好的耐Cd和菲降解能力,还具有去除溶液中可溶性Cd的能力。研究通过气质联用分析技术,提取并鉴定出Pseudomonas putida strain Q09菌株降解菲的8种可能产物,并利用这些降解产物构建该菌株对于菲的可能的生物降解路径。
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