奶牛乳房炎是危害全球奶牛业最严重的疾病之一,导致的经济损失包括牛奶质量和产量下降、兽医服务成本增加和奶牛淘汰等。致乳房炎病原菌包括细菌性和非细菌性病原菌,其中链球菌是主要病原菌之一。快速、准确诊断奶牛致病菌及其药物敏感性对合理治疗方案的制定具有重要意义。本研究在链球菌选择培养基EN基础上,以刃天青作为指示剂,对致奶牛乳腺炎链球菌快速鉴别诊断及药敏试验方法进行了改进。改进的EN-RS培养基保持良好的选择培养特性,不支持大肠杆菌和葡萄球菌等其他细菌生长,接种链球菌或其阳性奶样后培养一定时间,即可根据培养基颜色变化做出明确诊断。从两个奶牛场采集121份隐性乳房炎奶样,用EN-RS培养基进行快速诊断,结果表明能在6h内对是否有链球菌感染作出明确诊断,试验结果既用肉眼观察,也可用分光光度计检测,与标准方法的符合率分别为92.9%和91.1%。在检测的121份奶样中,链球菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌感染的奶样分别是50份、12份、64份,混合感染的奶样共有37份。在EN-RS培养基基础上,用不同浓度的抗生素进行链球菌快速药敏试验,并与标准纸片扩散法和肉汤稀释法比较,发现EN-RS培养基成分对部分抗生素的抑菌活性有不同程度的影响,需要对其浓度进行适当的调整。用调整浓度的抗生素进行快速药敏试验,所获结果与标准方法一致。对模拟奶样进行快速药敏试验,结果与细菌纯培养高度一致。用临床奶样离心沉淀或其细菌纯培养进行链球菌快速药敏试验,所获结果与标准方法符合率可以达到93.3%。致奶牛乳房炎链球菌快速诊断及药敏试验试剂盒的改进,可以更加快速直观地对临床奶样进行检测链球菌的有无,以及测定链球菌的对不同抗生素药物敏感性,并具有灵敏性高,特异性强等优点。特别适用于基层中小型奶牛场的需求,有广阔的应用前景。