【摘 要】
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目的:制备出无补体结合功能的免疫球蛋白样抗乙酰胆碱受体抗体,用于重症肌无力的特异性免疫治疗。方法:应用定点突变技术,将致病性抗乙酰胆碱受体抗体IGG637的重链CH2区的第3
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目的:制备出无补体结合功能的免疫球蛋白样抗乙酰胆碱受体抗体,用于重症肌无力的特异性免疫治疗。方法:应用定点突变技术,将致病性抗乙酰胆碱受体抗体IGG637的重链CH2区的第322位氨基酸进行K322A突变,获得的突变型抗体IgG637/K322A基因经转化大肠杆菌XL1-Blue进行增殖,测序证实突变序列正确后,转染哺乳类细胞CHO-k1进行表达,表达产物经酶联免疫吸附试验检测与补体C1q的结合活性。结果:突变型抗乙酰胆碱受体抗体IgG637/K322A不能与补体C1q结合,而对照抗体IGG637可以与其结合。结论:经定点突变,已经成功的获得了去除了补体结合功能的抗乙酰胆碱受体抗体。这为下一步制备具有对重症肌无力治疗作用的半寿期较长的免疫球蛋白样抗体准备了材料。
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