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目的：观察HIV-1包膜蛋白gp41中NHR C末端579-584位点对病毒包膜侵入能力的影响并初步探讨其机制。
方法：通过重叠延伸剪接法对HIV-1 HXB2株包膜蛋白gp41NHR C末端579-584位点进行定点突变，并构建包膜突变体的真核表达载体。利用包膜突变体的真核表达载体与HIV-1骨架质粒共转染HEK 293T细胞，72h后收获上清获得突变体包膜伪病毒，伪病毒感染U87CD4CXCR4后，通过检测细胞裂解物中firefly荧光素酶活力来反映病毒包膜感染能力的改变。同时将包膜突变体的真核表达载体转染HEK 293T细胞获得Env-293T，与表达HIV受体及辅助受体的TZM-bl细胞进行融合实验，融合后14h，检测细胞裂解物firefly荧光素酶活力可代表Env-293T融合活力，观察Env-293T与TZM-bl细胞融合能力的改变。利用Western blot方法检测突变体包膜在细胞裂解物表达水平的改变以及突变体包膜伪病毒表面包膜蛋白三聚体表达水平的变化。通过virus-binding ELISA方法检测突变体包膜伪病毒与针对不同包膜表位的单克隆抗体结合能力的改变。通过感染实验和融合实验来明确突变体包膜侵入能力的改变，并通过包膜表达水平的变化及表位的变化来分析HIV-1包膜蛋白gp41 579-584位点影响病毒侵入能力的可能机制。
结果：成功构建了6个针对HIV-1包膜蛋白gp41NHRC末端579-584位点的突变体真核表达载体；突变体V583I包膜伪病毒感染U87CD4CXCR4能力及与TZM-bl细胞的融合能力均显著降低，突变体R579K、R579A、E584A、R579E/E584R、L581 A/A582E/V5831包膜伪病毒感染能力及与TZM-bl细胞融合能力丧失；R579K、E584A、R579E/E584R、L58IA/A582E/V583I细胞裂解物中包膜蛋白gpl20的水平降低，其相应前体蛋白gpl60的切割比例下降。突变体包膜伪病毒R579K、E584A、L581A/A582E/V583I、V583I与单克隆抗体b12结合能力显著降低(P<0.05)。突变体包膜伪病毒R579K、L581A/A582E/V583I与单克隆抗体17b结合能力显著降低(P<0.05)，V583I与单克隆抗体17b结合能力显著增高(P<0.05)。R579K、R579E/E584R、L581A/A582E/V583I、V583I与2F5结合能力显著降低（P<0.05），R579K、L581A/A582E/V583I、V583I与4El0结合能力显著降低（P<0.05）。突变体包膜与CD4分子的结合能力没有明显变化。
结论：HIV-1 gp41中579-584位氨基酸对维持病毒包膜的侵入能力具有重要作用，该部位的突变会导致包膜侵入能力的显著降低或丧失。这种侵入能力改变的机制是：579位和584位氨基酸带电性质的改变使包膜前体蛋白切割效率降低，进而降低包膜与受体及辅助受体结合能力；581和582位点突变使包膜蛋白表达水平显著降低，进而降低包膜与受体及辅助受体结合能力；583位氨基酸改变使包膜受体结合能力降低，辅助受体结合能力增强。