TGF-β1对慢性骨髓增殖性疾病病人骨髓成纤维细胞增殖及Smad2、Smad7 mRNA表达的影响

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目的:通过比较不同浓度的TGF-β1对骨髓成纤维细胞增殖和对其Smad2、Smad7 mRNA表达水平的影响,以及这些影响在正常者和慢性骨髓增殖性疾病病人骨髓成纤维细胞之间的差异,以了解骨髓纤维化的原理。方法:分离2例缺铁性贫血(作为正常对照)、一例原发性血小板增多症和一例慢性粒细胞白血病病人骨髓液中的成纤维细胞,用含10%FCS的DMEM低糖培养液,在37℃,5%CO2培养箱中培养,0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA消化传代;MTT法测定0.01、0.1、1、2、5ng/ml的TGF-β1对正常者和慢性骨髓增殖性疾病病人的骨髓成纤维细胞增殖作用的影响;RT-PCR测定0.01、0.1、1、5ng/ml的TGF-β1对正常者和慢性骨髓增殖性疾病病人的骨髓成纤维细胞Smad2、Smad7 mRNA表达的影响。结果:MTT法显示2ng/ml及5ng/mlTGF-β1对骨髓成纤维细胞有促增殖作用(与对照组相比P值小于0.05),同一浓度的TGF-β1对正常者和骨髓增殖性疾病病人骨髓成纤维细胞促增值作用没有统计学意义上的差异;RT-PCR显示Smad2和Smad7mRNA的表达在TGF-β1浓度为0-1ng/ml之间时随着其浓度的增加而增加,而在TGF-β1浓度为5ng/ml时,Smad2 mRNA表达量有所下降。相同浓度TGF-βl刺激下,正常者和骨髓增殖性疾病病人骨髓成纤维细胞Smad2和Smad7 mRNA的表达没有显著差异。讨论:一定浓度的TGF-β1可促使骨髓成纤维细胞增殖;TGF-β1可活化人骨髓成纤维细胞Smad信号通路,引起Smad2和Smad7 mRNA表达上升;一例原发性血小板增多症和一例慢性粒细胞白血病病人骨髓成纤维细胞在TGF-B1/Smad信号途径没有存在异常。
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