脉管癌栓的检测及其与乳腺癌临床病理特点关系的研究

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以D2-40,CD31,CD34分别标记乳腺癌中淋巴管和血管,比较免疫组化染色和HE染色中脉管癌栓的检出率,探讨D2-40,CD31,CD34对乳腺癌中脉管癌栓的检测价值及对淋巴管和血管的鉴别价值;探讨淋巴管及血管、脉管癌栓的分布特点及脉管癌栓与患者年龄、肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、组织学分级及分子分型的关系。从而为研究乳腺癌的淋巴转移及临床治疗、选择辅助治疗方案、判断预后提供有力的依据。收集2007年1月-2010年12月在空军总医院行手术治疗的乳腺癌病例,删除临床资料不完整及术前进行新辅助化疗及放疗的病例,选取经病理证实为浸润性导管癌110例。另选取乳腺良性肿瘤10例做为对照。将所有的病例进行伊红-苏木素染色(Hematoxylin and eosin, HE)及孕激素受体(Progestogen receptor, PR)、雌激素受体(Estrogen receptor,ER)、人表皮生长因子受体2(Human epidermal growth factor receptor-2,HER-2)、细胞角蛋白5/6(Cytokeration5/6, CK5/6)、上皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor, EGFR)、D2-40,CD31,CD34,P63免疫组化染色。将免疫组化HER-2为(++)的病例进行荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)检测。根据肿瘤的腺样结构、细胞核异型性、核分裂像进行组织学评分及组织学分级;依据免疫组化结果将肿瘤分为四种分子分型。应用SPSS17.0统计软件进行分析,组间率的比较应用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。D2-40特异性表达于淋巴管,不表达于血管内皮包括毛细血管、静脉、动脉。纤维间质无D2-40非特性着色,但终末导管及小叶、导管原位癌的肌上皮可以表达D2-40。CD34,CD31在标记血管时,周围原位癌的基底膜及纤维间质可出现非特异性染色。在乳腺癌中,D2-40阳性的的淋巴管多位于肿瘤的周边,在肿瘤内部的间质中较少检测到淋巴管。CD31,CD34阳性的血管在肿瘤周边及内部均可以检测到,并且分布无明显差异。D2-40标记的淋巴管管壁薄由单层扁平上皮细胞围成,无平滑肌,形态不规则,其内无红细胞。在乳腺癌内部的淋巴管管腔较小、狭窄、闭塞,位于乳腺癌周围的淋巴管多为大且为开放性的管腔。而CD31,CD34标记的血管在乳腺癌内部多呈管腔狭窄,癌组织周围的血管的管多为开放性。在良性肿瘤中,CD31,CD34阳性的血管、D2-40阳性的淋巴管均为大的且为开放性的管腔,而且分布无差异。CD31,CD34标记血管时,尤其是CD34,由于间质的非特性染色,影响血管的识别,所以应结合免疫组化及形态学进行血管的判断。根据免疫组化,脉管癌栓多出现在肿瘤周围,肿瘤内部较少。110例浸润性乳腺癌病例,其中40例检出淋巴管癌栓(Lymph vessel tumoremboli,LVTE),11例位于肿瘤内部,28例位于肿瘤周围,1例在肿瘤内部及周围均出现了LVTE;23例检出血管癌栓(blood vessel invasion,BVI),其中肿瘤内部、肿瘤周围及两者同时出现的例数分别为7,14,2。脉管内瘤细胞癌栓表现为单个瘤细胞或成簇的瘤细胞位于脉管内,可或不与管壁相连,单个瘤细胞或瘤细胞团堵塞脉管的比较少见。LVTE及BVI在HE切片及免疫组化中的检出率分别为15.5%,36.36%,9.1%,20.91%。通过HE对淋巴管癌栓和血管癌栓检出率的假阳性率分别为2.8%,3.6%,假阴性率为23.6%,15.5%,而通过免疫组化,避免了假阳性率及假阴性率,使得淋巴管癌栓及血管癌栓的检出率比HE分别提高了20.91%,11.82%。LVTE的阳性率在各年龄组具有显著差异(χ~2=14.559,P=0.001),BVI的阳性率在各年龄组无差异(χ~2=0.509,P=0.775);LVTE,BVI与肿瘤大小均具有统计学意义(χ~2=7.734,P=0.021,χ~2=0.168,P=0.018);LVTE,BVI的阳性率均与肿瘤的组织学分级、腋窝淋巴结转移具有统计学意义(χ~2=18.323,P=0.000,χ~2=13.880,P=0.001;χ~2=7.121, P=0.008,χ~2=110,P=0.000);LVTE,BVI与乳腺癌的分子分型不具有统计学差异(χ~2=1.428,P=0.699;χ~2=4.299,P= 0.231)。D2-40特异性表达于淋巴管内皮,而不表达于血管内皮,且可应用于石蜡组织切片,是淋巴管的特异性标志物。CD31,CD34表达于血管且染色较好,CD31,CD34均出现了间质的非特异染色,但CD34的敏感性比CD31高,CD31特异性高于CD34。通过D2-40,CD31,CD34可以显著提高脉管癌栓的检出率,减少漏诊及误诊,从而准确对患者预后及治疗的进行评估。D2-40阳性LVTE与患者年龄、肿瘤的大小、组织学分级、腋窝淋巴结转移具有显著的的统计学差异。LVTE与BVI与乳腺癌的分子分型均无统计学意义,预后较差的Basal-like型,HER-2过表达型LVTE的检出率较高。CD31,CD34阳性的BVI与肿瘤的大小、组织学分级、腋窝淋巴结转移具有统计学意义。LVTE和BVI是评估患者预后、制定治疗方案的可靠指标。
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