樟树籽油降血脂功能及甘油二酯制备工艺研究

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樟树(Cinnamomum camphora)为樟科樟属中经济价值最大的树种之一主要分布在长江以南地区。樟树籽含油量达40%以上,其中葵酸(C10)和月桂酸(C12)这两种中碳链脂肪酸占脂肪酸总量的90%以上。樟树籽来源方便,资源量巨大,但对其有效利用却很少。为此,需要对樟树籽及其油脂进行系统性研究,同时,响应面法优化樟树籽油(camphor seed oil, CSO)酶法制备甘油二酯(diacylglycerol, DAG)的工艺研究,以有利于对其开发利用。本文以成熟樟树籽为实验材料,采用冰冻组织切片、尼罗红染色及激光扫描共聚焦显微镜观察樟树籽油体与含油量相关性,SD大鼠亚急性毒理性实验考查CSO食用安全性;CSO降血脂功能研究;采用响应面法优化CSO酶法制备DAG的工艺。研究结果如下:1、樟树籽子叶贮藏细胞形状多为多边形,少数为椭圆形,细胞内的油体直径为(0.68±0.11)μ m,且分布均匀,油体部分为不规则形状或椭圆形,少部分为球形;通过热压榨法可得40%的毛油,经过过滤、脱酸、脱色等步骤可得精炼CSO。2、亚急性毒理性实验中,30只雄性SD大鼠,随机分为3组,CSO组喂食CSO,大豆组喂食大豆油,对照组仅喂食基础饲料,喂食35d后大鼠无任何不适表现出现或者死亡,CSO组大鼠各项血液学指标(红细胞计数、白细胞计数、血红蛋白等)与对照无显著差异。3、降血脂功能研究中,30只雄性SD大鼠,随机分为3组,通过连续性喂食基础饲料中加胆固醇和胆酸制备高脂饲料造成的高血脂SD大鼠为模型,空白对照组仅喂食基础饲料,CSO组喂食CSO,大豆油组喂食大豆油,对比研究CSO对其血脂有关各项生化指标、肝脏脂肪含量、肝脏细胞结构及主动脉结构的影响,探讨了CSO的降血脂功能、预防和治疗脂肪肝及动脉粥样硬化的作用。结果显示:CSO能够降低大鼠体内TC的含量,增加血清中TG的含量。肝脏及主动脉病理组织学观察显示,大豆油组大鼠肝脏产生病变,其细胞大小不一,其内堆积许多脂类物质,而CSO组肝脏发生轻微病变,其细胞表面脂类物质较丰富,CSO能够延缓肝脏病变,且在主动脉切片观察中发现,CSO能够抑制脂类物质在主动脉内膜上的堆积。结果:CSO对实验性高血脂大鼠具有显著的降血脂及预防和脂肪肝疗效作用。3、以CSO为原料,优化脂肪酶水解CSO制备DAG的工艺。通过丙酮和叔丁醇对脂肪酶进行预处理,对3种固定化脂肪酶(Lipozyme RM IM、Lipozyme TL IM、Novozym435)进行筛选。以反应产物DAG质量分数和甘油三酯(Triacylglycerol, TAG)质量分数为响应值,含水量(加酶量的30%-50%)、加酶量(油质量的8%-10%)和温度(55-75℃)作为变量,利用响应面法(RSM)优化CSO制备DAG工艺。结果表明,Lipozyme RM IM经过预处理后,重复使用次数可达到11次,RSM法优化CSO制备DAG的最优工艺条件:加酶量10%,含水量40%,温度65℃。在此优化条件下,DAG质量分数和TAG质量分数分别为50.38%和40.68%。此工艺为CSO工业化生产中链DAG油提供理论和试验依据。
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