目的：体外培养及鉴定正常和增生性性瘢痕成纤维细胞,检测二者的差异并探讨转染siRNA-smad4沉默TGFβ/smad信号通路中的smad4前后对HS成纤维细胞的影响。方法：组织块贴壁法体外培养正常和瘢痕组织成纤维细胞,并通过成纤维细胞的生长特性和组化进行鉴定。采用RNAi技术通过LipofectamineTM2000转染成纤维细胞定向沉默smad4蛋白的表达,应用Western blot和RT-PCR技术分别检测检测HS成纤维细胞转染前后smad4、collagenI蛋白及mRNA的表达情况,并通过MTT及细胞流式术检测siRNA-smad4转染后24、48及72h时对成纤维细胞增殖能力以及对细胞凋亡、细胞周期的影响。结果：体外培养获得成纤维细胞,镜下成纤维细胞呈梭形生长,在一定时期内HS成纤维细胞较正常皮肤成纤维细胞生长速度快,经免疫组化鉴定后Vimentin阳性；增生性瘢痕比正常皮肤成纤维细胞smad4mRNA、collagenImRNA表达增强(P<0.05),增生性瘢痕转染后相对转染前smad4mRNA、collagenImRNA表达降低(P<0.05)；转染后HS成纤维细胞增殖能力受到显著抑制,细胞周期也明显缩短并且促进了细胞的凋亡。结论：通过siRNA-smad4靶向调控TGF β/smad信号通路,降低了smad4蛋白以及collagenI的表达,一定程度上减少了细胞外基质合成,抑制了成纤维细胞的增值并诱导了该细胞的凋亡,为防治病理性瘢痕提供了有效的基因治疗新靶点。